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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
65930 Anti-URGCP/URG4/FITC 熒光素標記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgG 0.2ml
65931 Anti-URGCP/URG4/FITC 熒光素標記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體C端IgG 0.2ml
65932 Anti-USF-1/FITC 熒光素標記上游刺激因子1抗體IgG 0.2ml
65933 Anti-VAMP-1/FITC 熒光素標記囊泡相關膜蛋白1抗體IgG 0.2ml
65934 Anti-VAMP-2/FITC 熒光素標記囊泡相關膜蛋白2抗體IgG 0.2ml
65935 Anti-VAMP-3/FITC 熒光素標記囊泡相關膜蛋白3抗體IgG 0.2ml
65936 Anti-VAP1/FITC 熒光素標記血管粘附蛋白1抗體IgG 0.2ml
65937 anti-VASH1/FITC 熒光素標記兔抗血管抑制蛋白1抗體IgG 0.2ml
65938 Anti-VAT/FITC 熒光素標記囊泡乙酰*通道抗體IgG 0.2ml
65939 Anti-USP1/FITC 熒光素標記泛素特異性蛋白酶1抗體IgG 0.2ml
65940 Anti-VASP/FITC 熒光素標記血管擴張刺激磷蛋白抗體IgG 0.2ml
65941 Anti-VCAM-1/FITC(CD106) 熒光素標記血管內皮細胞粘附分子抗體IgG 0.2ml
65942 Anti-VCAM-1/CD106 /FITC 熒光素標記血管內皮細胞粘附分子抗體IgG 0.2ml
65943 Anti-Vcan/FITC 熒光素標記蛋白聚糖Versican抗體IgG 0.2ml
65944 Anti-V.cholera Ogawa/FITC 熒光素標記01群稻葉型霍亂弧菌抗體IgG 0.2ml
65945 ANti-V5 tag/FITC 熒光素標記V5 tag標簽抗體IgG 0.2ml
65946 Anti-V5 tag/HRP 辣根過氧化物酶標記V5 tag標簽抗體IgG 0.2ml
65947 Anti-V.cholera Ogawa/FITC 熒光素標記01群小川型霍亂弧菌抗體IgG 0.2ml
65948 Anti-VCP/p97 /FITC 熒光素標記抗含纈酪肽蛋白抗體IgG 0.2ml
65949 Anti-V.cholera Ogawa/Biotin *化01群稻葉型霍亂弧菌抗體IgG 0.2ml
65950 Anti-V.cholera Ogawa/Biotin *化01群小川型霍亂弧菌抗體IgG 0.2ml
65951 Anti-Influenza A Virus H1/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗季節性A型流感病毒H1抗體IgG 0.2ml
65952 Anti-Influenza A Virus H3/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗季節性流感病毒H3抗體IgG 0.2ml
65953 Anti-H1N1-A/HRP(Influenza A virus)California 辣根過氧化物酶標記兔抗季節性A型人流感病毒H1N1抗體IgG(美國加州型) 0.2ml
65954 Anti-CD4/Biotin *化CD4抗體IgG 0.2ml
65955 Anti-Integrin AlphaV Beta1/Biotin *化兔抗人、大、小鼠整合素αVβ1抗體IgG 0.2ml
65956 Anti-Integrin alpha V/CD51 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠等整合素αV抗體IgG 0.2ml
65957 Anti-VDAC/FITC 熒光素標記電壓依賴性陰離子通道抗體IgG 0.2ml
65958 Anti-CD14/Biotin *化CD14抗體IgG 0.2ml
65959 human Rabies virus IgG/Biotin 人狂犬病免疫球蛋白抗體 0.2ml
65960 Anti-VDCC-L alpha/FITC 熒光素標記L-型電壓依賴型鈣通道α抗體IgG 0.2ml
65961 Anti-VDCC-L Beta/FITC 熒光素標記L-型電壓依賴型鈣通道β抗體IgG 0.2ml
65962 Anti-VEGF/FITC 熒光素標記VEGF抗體IgG 0.2ml
65963 Anti-VEGF(Rabbit)/FITC 熒光素標記血管內皮生長因子抗體IgG 0.2ml
65964 Anti-VEGF-A/FITC 熒光素標記血管內皮生長因子A抗體IgG 0.2ml
65965 Anti-VEGF-B/FITC 熒光素標記血管內皮生長因子B抗體IgG 0.2ml
65966 Anti-VEGF-C/FITC 熒光素標記血管內皮生長因子C型抗體IgG 0.2ml
65967 Anti-VEGF-D/FIGF/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠血管內皮生長因子D型VEGFD抗體IgG 0.2ml
65968 Anti-VEGF/RBITC 羅丹明標記VEGF抗體IgG 0.2ml
65969 Mouse Anti-human VEGF/FITC 熒光素標記小鼠抗人VEGF單克隆抗體IgG 0.2ml
65970 Anti-YAP1/FITC 熒光素標記原癌基因Yes相關蛋白1抗體IgG 0.2ml
65971 Anti-VEGFR1/VEGF-R1/Flt-1 /FITC 熒光素標記血管內皮生長因子受體1抗體IgG 0.2ml
65972 Anti-VEGFR2(VEGF-R2)Flk1/FITC 熒光素標記血管內皮生長因子受體2抗體IgG 0.2ml
65973 Anti-SV2A/FITC 熒光素標記突觸泡蛋白2A抗體IgG 0.2ml
65974 Anti-sVEGFR2/sFLK-1/FITC 熒光素標記可溶性血管內皮生長因子受體2抗體(人)IgG 0.2ml
65975 Anti-p-VEGFR2/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化血管內皮生長因子受體2抗體IgG 0.2ml
65976 Anti-FLT-3/CD135/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠FMS樣*激酶3IgG 0.2ml
65977 Anti-Phospho-FLT3 (Tyr591) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣*激酶3IgG 0.2ml
65978 Anti-Phospho-FLT3 (Tyr589/591) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣*激酶3抗體IgG 0.2ml
65979 Anti-Phospho-FLT3 (Tyr842) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣*激酶3抗體IgG 0.2ml
65980 Anti-Phospho-FLT3 (Tyr969) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣*激酶3抗體IgG 人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒 0.2ml
65981 Anti-VEGFR-3/FLt-4 /FITC 熒光素標記血管內皮細胞生長因子受體-3IgG 0.2ml
65982 Anti-VEGFR-3/FITC 熒光素標記血管內皮細胞生長因子受體-3抗體IgG 0.2ml
65983 Anti-HSP-70/RBITC 羅丹明標記熱休克蛋白-70抗體IgG 0.2ml
65984 Anti-VHL/FITC 熒光素標記一種腫瘤抑制因子抗體IgG 0.2ml
65985 Anti-Vimentin/FITC 熒光素標記波形蛋白抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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