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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人鳥苷酸結合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人鳥苷酸結合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人鳥苷酸結合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
66042 Anti-Zfp91/FITC 熒光素標記白血病相關新基因抗體IgG 0.2ml
66043 Anti-ZNF217/FITC 熒光素標記鋅指脂蛋白217抗體IgG 0.2ml
66044 Anti-ZNF268(1a)/FITC 熒光素標記鋅指脂蛋白-1a抗體IgG 0.2ml
66045 Anti-ZNF268(1b)/FITC 熒光素標記鋅指脂蛋白-1b抗體IgG 0.2ml
66046 Anti-ZNF268(1c)/FITC 熒光素標記鋅指脂蛋白-1c抗體IgG 0.2ml
66047 Anti-ZNF300 /FITC 熒光素標記鋅指蛋白300抗體IgG 0.2ml
66048 Anti-ZNF307/FITC 熒光素標記鋅指蛋白307抗體IgG 0.2ml
66049 Anti-ZNF474/FITC 熒光素標記鋅指蛋白474抗體IgG 0.2ml
66050 Anti-ZO-1/FITC 熒光素標記胞質緊密粘連蛋白1抗體IgG 0.2ml
66051 Anti-ZW10 peptide/FITC 熒光素標記著絲粒蛋白抗體IgG 0.2ml
66052 Anti-Zyxin/FITC 熒光素標記斑聯蛋白抗體IgG 0.2ml
66053 Anti-Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143)/FITC 熒光素標記磷酸化斑聯蛋白抗體IgG 0.2ml
66054 Anti-TORC1/CRTC1/FITC 熒光素標記環腺苷酸應答元件結合蛋白轉錄共激活因子TORC1抗體IgG 0.2ml
66055 Anti-Torc2/Crtc2/FITC 熒光素標記CREB轉錄共激活因子TORC2抗體IgG 0.2ml
66056 Anti-Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171)/FITC 熒光素標記磷酸化CREB轉錄共激活因子TORC2抗體IgG 0.2ml
66057 Anti-Gentamicin Monoclonal Antibody /Gold 膠體金離子標記小鼠抗*單克隆抗體IgG 0.5ml(35nm-40nm)
66058 Anti-Gentamicin/Gold 膠體金離子標記兔*抗體IgG 0.5ml(35nm-40nm)
66059 Anti-HBcAg/FITC 熒光素標記小鼠抗人乙肝核心抗原抗體IgG 0.2ml
66060 Anti-HBeAg/FITC 熒光素標記小鼠抗人乙肝e抗原抗體(1)IgG 0.2ml
66061 Anti-HBeAg/FITC 熒光素標記小鼠抗人乙肝e抗原抗體(2)IgG 0.2ml
66062 Anti-HBsAg/FITC 熒光素標記小鼠抗人乙肝表面抗原抗體IgG 0.2ml
66063 Anti-HBsAg/FITC 熒光素標記山羊抗人乙肝表面抗原抗體 IgG 0.2ml
66064 Anti-HAS/FITC 熒光素標記鼠抗人血清白蛋白單克隆抗體IgG 0.2ml
66065 Anti-SPECA/a-fodrin/FITC 熒光素標記a-包襯蛋白抗體IgG 0.2ml
66066 Anti- Alpha-AF/ Alpha-Afa/FITC 熒光素標記α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體IgG 0.2ml
66067 Anti-AFP/FITC 熒光標記鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體IgG 0.2ml
66068 Anti-AFP/HRP 辣根過氧化物酶標記鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體(包被)IgG 0.2ml
66069 Anti-AFP/Biotin *化鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體(包被)IgG 0.2ml
66070 Anti-AFP/HRP 辣根過氧化物酶標記鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)IgG 0.2ml
66071 Anti-AFP/Biotin *化鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)IgG 0.2ml
66072 Anti-CEA/Gold 膠體金離子標記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(包被)IgG 0.2ml
66073 Anti-CEA/HRP 辣根過氧化物酶標記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(包被)IgG 0.2ml
66074 Anti-CEA/Gold 膠體金離子標記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(檢測)IgG 0.2ml
66075 Anti-CEA/HRP 辣根過氧化物酶標記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(檢測)IgG 0.2ml
66076 Anti-CEA/Biotin *化鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(檢測)IgG 0.2ml
66077 Anti-GST-Tag/Biotin *標記兔抗重組*轉移酶GST標簽蛋白抗體IgG 0.2ml
66078 Anti-CD167a(DDR1)/HRP 辣根過氧化物酶標記CD167a抗體IgG 0.2ml
66079 Anti- Alpha -HCG/Gold 膠體金離子α 亞基人絨毛膜*單抗 IgG 0.2ml
66080 Anti- Beta-HCG/Gold 膠體金離子標記小鼠抗人β亞基人絨毛膜*單抗IgG 0.2ml
66081 Anti-PSA /Gold 膠體金離子標記抗鼠抗人前列腺特異性抗原單克隆抗體(檢測)IgG 0.2ml
66082 Anti-TRF/Gold 金離子標記抗轉鐵蛋白抗體IgG 0.5ml(15nm)
66083 Anti-CD8/PE 熒光素藻紅蛋白標記兔抗人、大、小鼠CD8抗體IgG 0.2ml
66084 Anti-VWF/PE 熒光素PE標記血管性血友病因子抗體IgG 0.2ml
66085 Anti-factor VIII/PE 熒光素PE標記第八因子相關抗原抗體IgG 0.2ml
66086 Anti-Annexin V/PE 熒光素PE標記兔抗人、大、小鼠、牛Annexin V抗體IgG 0.2ml
66087 Anti-CD184/CXC-R4/PE 熒光素PE標記細胞表面趨化因子受體4抗體IgG 0.2ml
66088 Anti-CD64/PE 熒光素PE標記免疫球蛋白G Fc段受體I 0.2ml
66089 Anti-WBSCR14/ChREBP /FITC 熒光素標記糖類應答元件結合蛋白ChREBP抗體IgG 0.2ml
66090 Biotin/HRP 辣根過氧化物酶標記* 0.1ml
66091 Avidin/HRP 人鳥苷酸結合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒辣根過氧化物酶標記親合素 0.1ml
66092 Goat Anti-human C3/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗人補體C3 0.1ml
66093 Goat Anti-human IgA/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗人IgA 0.1ml
66094 Goat Anti-human IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗人IgG 0.1ml
66095 Goat Anti-human IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗人IgM 0.1ml
66096 Goat Anti-mouse IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗小鼠IgG 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人鳥苷酸結合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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