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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
66210 Rabbit Anti-MK IgM/FITC 熒光素標記兔抗猴IgM 0.3ml
66211 Rabbit Anti-pig IgG/FITC 熒光素標記兔抗豬IgG 0.3ml
66212 Rabbit Anti-Pig IgM/FITC 熒光素標記兔抗豬IgM 0.3ml
66213 Rabbit Anti-Dog IgG/FITC 熒光素標記兔抗狗IgG 0.3ml
66214 Rabbit Anti-Rat IgG/FITC 熒光素標記兔抗大鼠IgG 0.3ml
66215 Rabbit Anti-rat IgM/FITC 熒光素標記兔抗大鼠IgM 0.3ml
66216 Rabbit Anti- guinea pig IgG/FITC 熒光素標記兔抗豚鼠IgG 0.3ml
66217 Rabbit Anti- guinea pig IgM/FITC 熒光素標記兔抗豚鼠IgM 0.3ml
66218 Rabbit Anti-bov IgG/FITC 熒光素標記兔抗牛IgG 0.3ml
66219 Rabbit Anti-bov IgM/FITC 熒光素標記兔抗牛IgM 0.3ml
66220 Rabbit Anti-chi IgG/FITC 熒光素標記兔抗雞IgG 0.3ml
66221 Rabbit Anti-chi IgM/FITC 熒光素標記兔抗雞IgM 0.3ml
66222 Rabbit Anti-Goat IgG/FITC 熒光素標記兔抗羊IgG 0.3ml
66223 Rabbit Anti-Goat IgM/FITC 熒光素標記兔抗羊IgM 0.3ml
66224 Rabbit Anti-mouse IgG/FITC 熒光素標記兔抗小鼠IgG 0.3ml
66225 Rabbit Anti-mouse IgM/FITC 熒光素標記兔抗小鼠IgM 0.3ml
66226 Goat Anti-human Fibrinogen/FITC 熒光素標記羊抗* 0.3ml
66227 Rabbit Anti-horse IgG/FITC 熒光素標記兔抗馬IgG 0.3ml
66228 Rabbit Anti-human IgG/FITC 熒光素標記兔抗人IgG 0.3ml
66229 Rabbit Anti-Meiiones Unguiculataus Milme-Edwauds/FITC 熒光素標記兔抗長爪沙鼠IgG 0.3ml
66230 Avidin/FITC 熒光素標記親合素 0.1ml
66231 Streptavidin/FITC 熒光素標記鏈霉親和素 0.3ml
66232 Donkey Anti-human IgG/FITC 熒光素標記驢抗人IgG 0.3ml
66233 Donkey Anti-rabbit/FITC 熒光素標記驢抗兔IgG 0.3ml
66234 Donkey Anti-Goat IgG/FITC 熒光素標記驢抗羊IgG 0.3ml
66235 Donkey Anti-Guinea IgG/FITC 熒光素標記驢抗豚鼠IgG 0.3ml
66236 rec Protein G/FITC 熒光素標記重組純化蛋白G 0.3ml
66237 rec Protein A/FITC 熒光素標記重組純化蛋白A 0.3ml
66238 Goat Anti-bovine IgG/Gold 金標記羊抗牛IgG(10/15nm) 0.5ml
66239 Goat Anti-Bovine IgM/Gold 金標記羊抗牛IgM(10nm/15nm) 2ml
66240 Goat Anti-human serum albumin/Gold 金標記羊抗人白蛋白(10/15nm) 2ml
66241 Goat Anti-human C3/Gold 金標記羊抗人IgC3(10nm/15nm) 2ml
66242 Goat Anti-human Fibrinogen/Gold 金標記羊抗*(10nm/15nm) 2ml
66243 Goat Anti-human IgA/Gold 金標記羊抗人IgA(10nm/15nm) 0.5ml
66244 Goat Anti-human IgG/Gold 金標記羊抗人IgG(10nm/15nm) 0.5ml
66245 Goat Anti-human IgM/Gold 金標記羊抗人IgM (10nm/15nm) 0.5ml
66246 Goat Anti-mouse IgG/Gold 金標記羊抗小鼠IgG(10nm/15nm) 0.5ml
66247 Goat Anti-mouse IgM/Gold 金標記羊抗小鼠IgM(10nm/15nm) 0.5ml
66248 Goat Anti-rat IgG/Gold 金標記羊抗大鼠IgG(10nm/15nm) 0.5ml
66249 Goat Anti-Guinea pig IgG/Gold 金標記羊抗豚鼠IgG (10nm/15nm) 0.5ml
66250 Goat Anti-rabbit IgG/Glod 金標記羊抗兔IgG(10nm/15nm) 0.5ml
66251 Mouse Anti-Goat IgG/Gold 金標記鼠抗羊IgG(10nm/15nm) 2ml
66252 Mouse Anti-Goat IgM/Gold 金標記鼠抗羊IgM (10nm/15nm) 2ml
66253 Mouse Anti-human IgG/Gold 金標記小鼠抗人IgG (10nm/15nm) 2ml
66254 Mouse Anti-human IgM/Gold 金標記小鼠抗人IgM (10nm/15nm) 2ml
66255 Mouse Anti-rabbit IgG/Gold 金標記小鼠抗兔IgG (10nm/15nm) 0.5ml
66256 Mouse Anti-rabbit IgM/Gold 金標記小鼠抗兔IgM (10nm/15nm) 2ml
66257 Mose Anti-rat IgG/Gold 金標記小鼠抗大鼠IgG (10nm/15nm) 2ml
66258 Mose Anti-rat IgM/Gold 金標記小鼠抗大鼠IgM(10nm/15nm) 2ml
66259 Rabbit Anti-Avidin/Gold 金標記兔抗親和素 (10nm/15nm) 2ml
66260 Rabbit Anti-human IgG/Gold 金標記兔抗人IgG(10nm/15nm) 0.5ml
66261 Rabbit Anti-human IgM/Gold 金標記兔抗人IgM (10nm/15nm) 0.5ml
66262 Rabbit Anti-human IgA/Gold 金標記兔抗人IgA(10nm/15nm) 0.5ml
66263 Rabbit Anti-bovine IgG/Gold 金標記兔抗牛IgG(10或15nm) 0.5ml
66264 Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold 金標記兔抗牛IgM (10或15nm) 2ml
66265 Rabbit Anti-Bovine TG/Gold 金標記兔抗牛甲狀腺球蛋白 (10或15nm) 2ml
66266 Rabbit Anti-chicken IgG/Gold 金標記兔抗雞IgG(10nm/15nm) 0.5ml
66267 Rabbit Anti-chicken IgM/Gold 金標記兔抗雞IgM (10nm/15nm) 2ml
66268 Rabbit Anti-dog IgG/Gold 人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒金標記兔抗狗IgG (10nm/15nm) 2ml
66269 Rabbit Anti-dog IgM/Gold 金標記兔抗狗IgM (10nm/15nm) 2ml
66270 Rabbit Anti-FITC/Gold 金標記兔抗熒光素 (10nm/15nm) 2ml
66271 Rabbit Anti-Goat IgG/Gold 金標記兔抗羊IgG (10nm/15nm) 0.5ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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