猴熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒科研
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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人膠原吡啶交聯(PYD)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人膠原吡啶交聯(PYD)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人膠原吡啶交聯(PYD)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
66781 PMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22多肽 0.5mg
66782 PI3K 磷脂酰肌醇激酶(抗原) 0.5mg
66783 BMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形態發生蛋白4(抗原) 0.5mg
66784 PLGF (Placenta growth factor) 小鼠胎盤生長因子(多肽抗原) 0.5mg
66785 PLGF (Placenta growth factor) 胎盤生長因子(多肽抗原) 0.5mg
66786 PLGF (Placenta growth factor fragment)(human) 人胎盤生長因子(多肽抗原) 0.5mg
66787 PP-1 蛋白磷酸酯酶-1(抗原) 0.5mg
66788 BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨成型蛋白受體1A抗原 0.5mg
66789 PPAR-delta (peroxisome proliferator-activated receptor) D型-過氧化酶活化增生受體(多肽) 0.5mg
66790 PP-2A (protein phosphatase 2A) 蛋白質磷酸酶-2A(抗原) 0.5mg
66791 BOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細胞特異性轉錄因子抗原 0.5mg
66792 PP-2B alpha 1 蛋白磷酸酯酶-2B 催化亞單位(抗原) 0.5mg
66793 PR (Progestogerone receptor) 孕激素受體(抗原) 0.5mg
66794 PS-1(NT),Presennillin-1(S182) 早老素蛋白-1(抗原) 0.5mg
66795 PS-1,Presennillin-1(CT) 早老素蛋白-1(S182) 0.5mg
66796 BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(mouse rat) 乳腺癌易感基因1抗原(小鼠 大鼠) 0.5mg
66797 BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(human) 乳腺癌易感基因1抗原(人) 0.5mg
66798 PSD-95 突觸后密度蛋白95(抗原) 0.5mg
66799 BRCA2(Breast cancer susceptbility gene 2) 乳腺癌易感基因2抗原 0.5mg
66800 PTP-1B (Protein-tyrosine phosphatase, non-receptor ) 蛋白*磷酸酶-1B(抗原) 0.5mg
66801 RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 維甲酸受體-α 多肽 0.5mg
66802 glycoprotein (E1 glycoprotein) [Rubella virus] 風疹病毒糖蛋白多肽片段 0.5mg
66803 SAP-1 (Synapse associated protein-I) peptide 突觸相關蛋白-1(多肽抗原) 0.5mg
66804 SARS S-protein(抗原) 0.5mg
66805 SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗原) 0.5mg
66806 BSEP peptide 膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗原 0.5mg
66807 Secretin 分泌素(抗原) 0.5mg
66808 Secretin receptor 分泌素受體(抗原) 0.5mg
66809 Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 細胞激酶信號-1抑制劑(抗原) 0.5mg
66810 SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽 0.5mg
66811 Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原) 0.5mg
66812 Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原) 0.5mg
66813 CA15-3 peptide 乳腺癌相關抗原抗原 0.5mg
66814 Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質受體(抗原) 0.5mg
66815 p-Caldesmon(phosphor-Ser789) 磷酸化鈣介質素抗原 0.5mg
66816 NK-2R peptide 神經激肽A受體(多肽抗原) 0.5mg
66817 Calpain 1 鈣蛋白酶(多肽) 0.5mg
66818 Tanis/SELS (Selenoprotein S)又稱SELS 炎癥負調控因子蛋白(抗原) 0.5mg
66819 Tau protein 微管相關蛋白(抗原) 0.5mg
66820 omerase (TE) 端粒酶(催化亞單位)(多肽抗原) 0.5mg
66821 TGF-Alpha (Ttansforming Growth Factor –Alpha) 轉移生長因子–α(抗原) 0.5mg
66822 CaMK2a(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II alpha) 鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗原 0.5mg
66823 Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) 鈣/鈣調蛋白依賴蛋白激酶IG抗原 0.5mg
66824 TGF- Beta1 (Ttansforming Growth Factor – Beta1) 轉移生長因子–β1(抗原) 0.5mg
66825 CaMK2b(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II beita) 鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2b抗原 0.5mg
66826 CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原 0.5mg
66827 CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環化酶相關蛋白CAP-2抗原 0.5mg
66828 TGF- Beta2 (Ttansforming Growth Factor – Beta2) 轉移生長因子–β2(抗原) 0.5mg
66829 TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3) 轉移生長因子–β3(抗原) 0.5mg
66830 TGF- Beta R2 peptide 轉移生長因子β受體2(多肽抗原) 0.5mg
66831 Thymosin Alpha-1 * α-1 (*-Thymosin alpha-1) 0.5mg
66832 Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12(多肽) 0.5mg
66833 Caspase-12(hunman) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗原(人) 0.5mg
66834 TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2) 膠質細胞系源性神經營養因子(多肽)人膠原吡啶交聯(PYD)ELISA試劑盒 0.5mg
66835 TNF-Alpha(Tumor Necrosis Factor-Alpha) 人腫瘤壞死因子-α(多肽抗原) 0.5mg
66836 TRA16 (Testicular orphan nuclear receptor-4 (TR4)-associated protein) 睪丸激素受體相關蛋白 0.5mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人膠原吡啶交聯(PYD)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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