人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

67281 MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2)  肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗原  0.5mg
67282 Mfn1 (Mitofusin1)  線粒體融合蛋白1  0.5mg
67283 MT(metallothionein)  金屬硫蛋白抗原  0.5mg
67284 MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)  層粘連蛋白受體1抗體  0.5mg
67285 MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT)  層粘連蛋白受體1抗原（C端）  0.5mg
67286 MK(Midkine)  中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗原  0.5mg
67287 MLC/Myosin light chain 3 peptide  肌球蛋白輕鏈3抗原  0.5mg
67288 MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor)  巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗原  0.5mg
67289 MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta)  巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗原  0.5mg
67290 CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta)  CD122/白介素2受體β鏈抗原  0.5mg
67291 MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2)  巨噬細(xì)胞炎癥蛋白2抗原  0.5mg
67292 MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13)  基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原  0.5mg
67293 MMP-20(matrix metalloproteinase 20)  基質(zhì)金屬蛋白酶20抗原  0.5mg
67294 MMP-17(Matrix metalloproteinase-17)  基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗原  0.5mg
67295 MMP-26(Matrix metalloproteinase-26)  基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗原  0.5mg
67296 MMP-9(matrix metalloproteinase 9)  基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗原  0.5mg
67297 MMP-10(matrix metalloproteinase 10)  基質(zhì)金屬蛋白酶-10抗原  0.5mg
67298 MPO peptide  髓過(guò)氧化物酶抗原  0.5mg
67299 MRP2 (multidrug resistance-associated protein2)  多藥耐藥相關(guān)蛋白2  0.5mg
67300 MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5)  多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原  0.5mg
67301 MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28)  線粒體核糖體蛋白L28(抗原)  0.5mg
67302 MLH1(Mutl homolog l gene)  錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗原  0.5mg
67303 MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1)  胃粘液素抗原  0.5mg
67304 MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B)  褪黑素受體1B抗原  0.5mg
67305 MLN(Motilin)peptide  胃動(dòng)素多肽  0.5mg
67306 mTOR(Mammalian target of rapamycin)  雷帕霉素靶蛋白  0.5mg
67307 Muc-1/CD227 Anti-gen (mucin-1)  粘蛋白-1/上皮膜抗原  0.5mg
67308 MyD88 (myeloid differential protein-88)  髓樣分化蛋白抗原  0.5mg
67309 PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2)  周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗原  0.5mg
67310 MYSM1(Myb-like, SWIRM and MPN domain-containing protein 1)  MYSM1抗原  0.5mg
67311 MYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse  MYOZ抗原  0.5mg
67312 CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7)  煙堿型乙酰*受體α7(多肽)  0.5mg
67313 Nanog fragment  干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白(多肽)  0.5mg
67314 Natrexone/BSA:Natrexone/KLH  納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍(lán)蛋白  0.5mg
67315 NAP1 (nucleosome assembly protein 1)  核小體組裝蛋白1（多肽）  0.5mg
67316 N-cadherin  N-鈣粘附分子抗原  0.5mg
67317 E-cadherin  E-鈣粘附分子抗原  0.5mg
67318 Nephrin Protein  *  0.5mg
67319 Neurocan  神經(jīng)粘蛋白抗原  0.5mg
67320 NF2/merlin(neurofibromatosis type 2)  2型神經(jīng)纖維瘤抗原  0.5mg
67321 NFATc1  活化T細(xì)胞核因子1蛋白  0.5mg
67322 phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide  磷酸化細(xì)胞核因子/磷酸化k基因結(jié)合核因子抗原  0.5mg
67323 NF-κBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB)  細(xì)胞核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗原  0.5mg
67324 NGN3(neurogenin 3; Neurog3)  神經(jīng)元素3抗原  0.5mg
67325 NGX6 (nasopharyngeal carcinoma/NPC associated gene 6)  鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6（多肽）  0.5mg
67326 NIT2 (nitrilase family, member 2)  NIT2蛋白抗原  0.5mg
67327 NKA(Neurokinin A)  神經(jīng)激肽A抗原  0.5mg
67328 NKG2A/CD159a/KLRC1  NK細(xì)胞受體2A/自然殺傷細(xì)胞活化性受體2A抗原  0.5mg
67329 NKG2D(natural killer cell group 2D)  NK細(xì)胞受體/自然殺傷細(xì)胞活化性受體  0.5mg
67330 Nm23(NDP Kinase A,NDPKA)  腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗原  0.5mg
67331 Nm23-H1 (nucleoside dIPhosphatase kinase A)  腫瘤抑制基因抗原  0.5mg
67332 Nogo-B/A  軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子-B/A抗原  0.5mg
67333 NOS-2 peptide  一氧化氮合成酶-2多肽抗原  0.5mg
67334 Notch1/MOTC(Neurogenic locus notch homolog protein 1)  跨膜受體蛋白Notch-1抗原  0.5mg
67335 NADPH peptide  還原型輔酶Ⅱ抗原  0.5mg
67336 NADPH peptide  還原型輔酶Ⅱ抗原  0.5mg
67337 proCNP/NPPC (pro-natriuretic peptide)  促尿鈉排泄肽前體C抗原  0.5mg
67338 NPY2R(Neuropeptide Y Receptor Type 2)  神經(jīng)肽Y受體2（多肽）  0.5mg
67339 NPY1R (neuropeptide Y1 receptor)  神經(jīng)肽Y1受體抗原  0.5mg
67340 NQO1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase l)  醌氧化還原酶抗原  0.5mg
67341 NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  *受體1（多肽）  0.5mg
67342 NR1/NMDAR1/GLUR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  *受體1抗原  0.5mg
67343 NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  *受體1抗原  0.5mg
67344 NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C)  *受體2C（多肽）  0.5mg
67345 N-ras  人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒原癌基因抗原  0.5mg
67346 Nrf2 peptide  核因子2相關(guān)因子2抗原  0.5mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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