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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人腺苷三磷酸結合盒轉運體A1(ABCA1)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人腺苷三磷酸結合盒轉運體A1(ABCA1)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人腺苷三磷酸結合盒轉運體A1(ABCA1)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
67570 CCK8 (Cholecystokinin-8) 膽囊收縮素/縮膽囊素(八肽) 0.5mg
67571 CD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原) 0.5mg
67572 CD4 CD4(抗原) 0.5mg
67573 CD4(Rabbit Anti-Human Mouse rat CD4 Palyclonal Anti-body) CD4抗原 0.5mg
67574 CD8 CD8抗原 0.5mg
67575 CD20(抗原) CD20(抗原) 0.5mg
67576 CD25/IL-2RA(Imterleukm-2 Receptor alpha) CD25/白介素2-受體(抗原) 0.5mg
67577 CD31(PECAM-1) 血小板內皮細胞黏附分子-1(抗原) 0.5mg
67578 CD34 CD34(多肽抗原) 0.5mg
67579 CD56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1) 神經細胞粘附分子1(抗原) 0.5mg
67580 CEAcam8/CD67 (carcinoembryonic Anti-gen-related cell adhesion molecule 8) 癌胚抗原相關細胞粘附分子8(抗原) 0.5mg
67581 CD68 CD68抗原 0.5mg
67582 CD68 CD68(多肽抗原) 0.5ml
67583 CD117/c-kit/SCFR 干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原(抗原) 0.5mg
67584 CD133 Anti-gen 造血干細胞抗原(多肽抗原) 0.5mg
67585 CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原) 0.5mg
67586 CD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原 0.5mg
67587 CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴細胞衰減蛋白(抗原) 0.5mg
67588 CDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2) 周期素依賴激酶2(抗原) 0.5mg
67589 CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原) 0.5ml
67590 CEA (Carcinoembryonic Anti-gen ) 人癌胚抗原(抗原) 0.5mg
67591 ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈堿型乙酰*受體M2(抗原) 0.5mg
67592 Connexin-43(Cx43) 間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原) 0.5mg
67593 Connexin-45(CX45) 間隙連接蛋白45(抗原) 0.5mg
67594 Anti-Collagen II II 型膠原(抗原) 0.5mg
67595 CXCR1 (CXC-chemokine receptor 1) 細胞表面趨化因子受體1抗原 0.5mg
67596 COX-2 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-2) 前列腺素氧化環化酶2(抗原) 0.5mg
67597 c-phycocyanin(C-PC) C-藻藍素(藻藍蛋白) 0.5mg
67598 CTGF (connective tissue growth factor) 結締組織生長因子(多肽抗原) 0.5mg
67599 Cyclin E 周期素E/原癌基因抗原 0.5mg
67600 Dnmt3a(cytosine-5)-methyltransferase 3A) DNA甲基轉移酶-3α(抗原) 0.5mg
67601 Dengue Virus Anti-body [Envelope protein] 登革熱病毒蛋白(多肽抗原) 0.5mg
67602 Cyclin C 周期素 C(抗原) 0.5mg
67603 CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降鈣素基因相關肽 0.5mg
67604 CULLIN (Cdc53/CUL) 0.5mg
67605 CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase) 細胞色素P450單氧化酶(多肽抗原) 0.5mg
67606 CXorf36(uncharacterized protein Cxorf36 precursor) 脫羧酶蛋白體36 cxorf36抗原 0.5mg
67607 Deltex-1 (DTX1) (Deltex protein 1)抗原 0.5mg
67608 DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT) DISC1 N端抗原 0.5mg
67609 DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原 0.5mg
67610 DR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受體(抗原) 0.5mg
67611 E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16) 人乳頭瘤病毒16型E7蛋白抗原 0.5mg
67612 EGF-R (Epidemal growth factor receptor) 表皮生長因子受體(抗原) 0.5mg
67613 Eukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬氨酸蛋白酶家族蛋白(水稻蛋白的一種)(抗原) 0.5mg
67614 FAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor) 一種新型的胰島細胞因子(抗原) 0.5mg
67615 Fabp2 (fatty acid binding protein 2, intestinal) 脂肪酸結合蛋白2(抗原) 0.5mg
67616 ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關基因(抗原) 0.5mg
67617 Fibronectin (FN) 纖維連結蛋白(多肽抗原) 0.5mg
67618 FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細胞生長因子-7/纖維母細胞生長因子 (抗原) 0.5mg
67619 FGFR1 peptide 堿性成纖維細胞生長因子受體-1(多肽抗原) 0.5mg
67620 FGFR2(Fibroblast Growth Factor Receptor 2) 成纖維細胞生長因子受體2抗原 0.5mg
67621 FGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8) 成纖維細胞生長因子-8/纖維母細胞生長因子-8 (抗原) 0.5mg
67622 GAD-65 (glutamate decarboxylase) *脫羧酶-65(C端多肽) 0.5mg
67623 GAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease ) 3-磷酸甘油醛脫氫酶(抗原) 人腺苷三磷酸結合盒轉運體A1(ABCA1)ELISA試劑盒 0.5mg
67624 Galectin-3 半乳糖凝集素-3(抗原) 0.5mg
67625 GCS (glucosylceramide synthase, GCS) 葡萄糖神經酰胺合成酶(抗原) 0.5mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人腺苷三磷酸結合盒轉運體A1(ABCA1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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