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人1,3-二磷酸甘油酸（1,3-DPG）ELISA試劑盒

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人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

67852 BNP(Human)  人腦鈉素/腦鈉尿肽 48T
67853 TNF－ Alpha  人腫瘤壞死因子-α 48T
67854 TNF－ Beta  人腫瘤壞死因子-β 48T
67855 6His-Tag  6個(gè)* 48T
67856 ACE Human  人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 48T
67857 Activin A Human  人激活素 A 48T
67858 ALCAM Human  人白細(xì)胞活化粘附因子 48T
67859 Amphiregulin Human  人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子 48T
67860 Angiopoietin-2 Human  人血管生成素-2 48T
67861 APO E Human  人載脂蛋白 E 48T
67862 AVP Human  人抗利尿激素 48T
67863 BMP-9 Human  人骨成型蛋白-9 48T
67864 CAE-Ab Human  抗人胸腺瘤抗體 48T
67865 ABCA1(human)  人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A1 48T
67866 sTNF Alpha－RI(humen)  人可溶性腫瘤壞死因子-受體1 48T
67867 cAMP Human  人* 48T
67868 sCD 40L Human  人可溶性細(xì)胞表面分化抗原40配體 48T
67869 cGMP Human  人環(huán)磷酸鳥苷 48T
67870 6Ckine /CCL21/SLC Human  人淋巴組織趨化性細(xì)胞因子 48T
67871 ENA human  人上皮細(xì)胞誘導(dǎo)中型粘細(xì)胞活化因子 48T
67872 ENA-78 human  人趨化因子 ENA-78 48T
67873 eNOS human  人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶 48T
67874 Eotaxin human  人噬酸性粒細(xì)胞趨化因子 48T
67875 Eotaxin-2 human  人噬酸性粒細(xì)胞趨化因子-2 48T
67876 EPO human  人促紅細(xì)胞生成素 48T
67877 EPO Receipter human  人促紅細(xì)胞生成素受體 48T
67878 Fas/Apo-1 human  人凋亡相關(guān)因子 48T
67879 Fas-L human  人凋亡相關(guān)因子配體 48T
67880 FGF-4 human  人成纖維生長(zhǎng)因子-4 48T
67881 FGF-6 human  人成纖維生長(zhǎng)因子-6 48T
67882 FGF-6 human  人成纖維生長(zhǎng)因子-6 45T
67883 Flt3 human  人FMS樣*激酶3 48T
67884 Flt3 Ligand human  人Flt3 配體 48T
67885 NO mouse  一氧化氮ELISA(小鼠) 48T
67886 sTNF Alpha－RII(humen)  人可溶性腫瘤壞死因子-受體2 48T
67887 Follistatin human  人卵泡抑素 48T
67888 GCP-2 human  人中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2 48T
67889 GFAP human  人膠質(zhì)纖維酸性蛋白 48T
67890 GH human  人生長(zhǎng)因子 48T
67891 GRO human  人腫瘤生長(zhǎng)相關(guān)因子 48T
67892 HGH human  人生長(zhǎng)激素 48T
67893 HGF human  人肝生素 48T
67894 HMGB1 human  人高遷移率族蛋白 48T
67895 sICAM-1 human  人可溶性細(xì)胞間粘附分子-1 48T
67896 sICAM-2 human  人可溶性細(xì)胞間粘附分子-2 48T
67897 FGF-7 human  人角蛋白細(xì)胞生長(zhǎng)因子 48T
67898 FGF-9 human  人成纖維生長(zhǎng)因子-9 48T
67899 GLP-1(human)  人胰高血糖素樣肽1 48T
67900 TGF Beta 2  人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 β 2 48T
67901 TGF Beta 1  人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 β 1 48T
67902 ER(Estrpgen Receptor)Human  人雌激素受體 48T
67903 PR(Progestogerone receptor)Human  人孕激素受體 48T
67904 EGF 人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒 人表皮生長(zhǎng)因子 48T
67905 EGFR  人表皮生長(zhǎng)因子受體 48T
67906 ERK1 human  人絲裂原活化蛋白激酶1 48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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