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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
68530 CYFRA21-1(Human cytokeratin fragment antigen 21-1) ELISA Kit 人細胞角蛋白21-1片段 48T
68531 CDT(Human carbohydrate-deficient transferrin) ELISA Kit 人糖缺失性轉鐵蛋白 48T
68532 Dsg-1(Human desmogleins 1) ELISA Kit 人橋粒芯糖蛋白-1 48T
68533 Human CA724 ELISA Kit 人腫瘤標志物 48T
68534 NGAL(Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin) ELISA Kit 人中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白 48T
68535 LTA(Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen) ELISA Kit 人非小細胞肺癌抗原 48T
68536 DR-70TM(Human tumor marker DR-70 for lung cancer) ELISA Kit 人肺癌標志物DR-70 48T
68537 FSA(Human fetal sulfoslycoprotein antigen) ELISA Kit 人胚胎性硫糖蛋白抗原 48T
68538 BJP(Human Bence-Jones protein) ELISA Kit 人本周蛋白 48T
68539 CEF(Human Carcinoembryonic Ferritin) ELISA Kit 人癌胚鐵蛋白 48T
68540 SCCAg(Human squamous cell carcinoma related antigen) ELISA Kit 人鱗狀細胞癌相關抗原 48T
68541 TSA(Human tumor specific antigen) ELISA Kit 人腫瘤特異性抗原 48T
68542 MMSAM(Human melanoma metastasis surface adhesion molecule) ELISA Kit 人黑色素瘤轉移表面黏附分子 48T
68543 BRCA-2(Human breast cancer susceptibility protein 2) ELISA Kit 人乳腺癌易感蛋白2 48T
68544 ASK-1(Human apoptosis signal regulating kinase 1) ELISA Kit 人凋亡信號調節激酶I 48T
68545 BAX(Human Bcl-2 associated X protein) ELISA Kit 人Bcl-2相關X蛋白 48T
68546 TF(Human Transfer factor) ELISA Kit 人轉移因子 48T
68547 CCA(Human Colon Cancer Antigen) ELISA Kit 人結腸癌抗原 48T
68548 Human H-ras ELISA Kit 人H-ras 48T
68549 Human c-sis ELISA Kit 人c-sis 48T
68550 Human c-jun ELISA Kit 人c-jun 48T
68551 Human c-fos ELISA Kit 人c-fos 48T
68552 c-myc(Human c-myc Oncogene product) ELISA Kit 人c-myc癌基因產物 48T
68553 Smad1(Human Mothers against decapentaplegic homolog 1) ELISA Kit 人Smad1 48T
68554 Smad7(Human Mothers against decapentaplegic homolog 7) ELISA Kit 人Smad7 48T
68555 TAA(Human tumor-associated antigen) ELISA Kit 人腫瘤相關抗原 48T
68556 TIEG1(Human TGF-beta-inducible early response gene-1) ELISA Kit 人TGF-β誘導早期基因1 48T
68557 TAF(Human tumor angiogenesis factors) ELISA Kit 人腫瘤血管生長因子 48T
68558 CK-20(Human cytokeratin 20) ELISA Kit 人細胞角蛋白20 48T
68559 CK-19(Human cytokeratin 19) ELISA Kit 人細胞角蛋白19 48T
68560 CK-18(Human cytokeratin 18) ELISA Kit 人細胞角蛋白18 48T
68561 CgA(Human Chromogranin) ELISA Kit 人嗜鉻蛋白A 48T
68562 pRB(Human retinoblastoma tumor suppressor protein) ELISA Kit 人視網膜母細胞瘤抑制蛋白 48T
68563 MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit 人成熟促進因子 48T
68564 ASGPR(Human asialoglyco protein receptor) ELISA Kit 人去唾液酸糖蛋白受體 48T
68565 sTfR(Human soluble transferrin receptor) ELISA Kit 人可溶性轉鐵蛋白受體 48T
68566 MT(Human Metallothionein) ELISA Kit 人金屬硫蛋白 48T
68567 AFP-L3(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3) ELISA Kit 人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3 48T
68568 AFP-L2(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2) ELISA Kit 人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2 48T
68569 AFP-L1(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1) ELISA Kit 人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1 48T
68570 MART/Melan-A(Human Melanoma Marker A) ELISA Kit 人黑色素瘤標記物 48T
68571 CK-HMW(Human cytokeratin High Molecular Weight) ELISA Kit 人高分子量細胞角蛋白 48T
68572 PHC(Human primary hepatic carcinoma) ELISA Kit 人肝癌抗原 48T
68573 Apaf-1(Human apoptosis protease activating factor-1) ELISA Kit 人凋亡蛋白酶激活因子1 48T
68574 NPC(Human nasopharyngeal carcinoma) ELISA Kit 人鼻咽癌 48T
68575 UBC(Human urinary bladder cancer antigen) ELISA Kit 人膀胱癌抗原 48T
68576 P-CK(Human pan-cytokeratin) ELISA Kit 人廣譜細胞角蛋白 48T
68577 Human Oncogene Protein p190/bcr-abl ELISA Kit 人癌基因蛋白質p190/bcr-abl 48T
68578 BTA(Human Bladder tumor antigen) ELISA Kit 人膀胱腫瘤抗原 48T
68579 MK(Human Midkine) ELISA Kit 人中期因子 48T
68580 Bid(Human BH3 interacting domain death agonist) ELISA Kit 人BH3結構域凋亡誘導蛋白 48T
68581 Bcl-2(Human B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA Kit 人B細胞淋巴瘤因子2 48T
68582人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒 TSGF(Human Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) ELISA Kit 人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子 48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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