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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
69085 CR(Human Calretinin) ELISA Kit 人鈣結合蛋白 48T
69086 BMP-6(Human Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 人骨形成蛋白6 48T
69087 FABP(Human fatty acid-binding protein) ELISA Kit 人脂肪酸結合蛋白 48T
69088 ABCA1(Human ATP-binding cassette transporter A1) ELISA Kit 人腺苷三磷酸結合盒轉運體A1 48T
69089 HRGP(Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein) ELISA Kit 人羥*糖蛋白 48T
69090 GLUT1(Human Glucose transporter 1) ELISA Kit 人葡萄糖轉運蛋白1 48T
69091 LDL(Human low density lipoprotein) ELISA Kit 人低密度脂蛋白 48T
69092 AA(Human Arachidonic Acid) ELISA Kit 人花生四烯酸 48T
69093 BSP(Human bone sialoprotein) ELISA Kit 人骨涎蛋白 48T
69094 BALP(Human bone alkaline phosphatase) ELISA Kit 人骨堿性磷酸酶 48T
69095 CTX(Human Cyclophosphamide) ELISA Kit 人* 48T
69096 1,3-DPG(Human 1,3-Disphosphoglycerate, ELISA Kit 人1,3-二磷酸甘油酸 48T
69097 1,5-AG(Human 1,5-anhydroglucitol) ELISA Kit 人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨 48T
69098 Beta-OHB(Human Beta-Hydroxybutyric Acid) ELISA Kit 人β羥丁酸 48T
69099 HDL-C(Human High density lipoprotein cholesterol) ELISA Kit 人高密度脂蛋白* 48T
69100 N-MID-OT(Human N-MID Osteocalcin) ELISA Kit 人N端中段骨鈣素 48T
69101 LRP-6(Human low-density lipoprotein-receptor-related protein) ELISA Kit 人低密度脂蛋白受體相關蛋白6 48T
69102 VLDLR(Human very low density lipoprotein receptor) ELISA Kit 人極低密度脂蛋白受體 48T
69103 LDLR(Human very low density lipoprotein receptor) ELISA Kit 人低密度脂蛋白受體 48T
69104 HDL(Human High density lipoprotein) ELISA Kit 人高密度脂蛋白 48T
69105 Alpha-GST(Human Alpha-glutathione S-transferases) ELISA Kit 人α*S轉移酶 48T
69106 GSH-Px kit(human) 人*過氧化物酶elisa試劑盒 96T
69107 Hcy(Human Homocysteic acid) ELISA Kit 人同型半* 48T
69108 FFA(Human free fatty acids) ELISA Kit 人游離脂肪酸 48T
69109 ON(Human osteonectin) ELISA Kit 人骨粘連蛋白 48T
69110 FA(Human Folic acid) ELISA Kit 人* 96T
69111 ET(Human endotoxin) ELISA Kit 人內毒素 48T
69112 PPAR- Gamma(Human Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma) ELISA Kit 人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ 48T
69113 CsA(Human Cyclosporine A) ELISA Kit 人*A 48T
69114 GFAP(Human glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit 人神經膠質纖維酸性蛋白 48T
69115 15-LO/LOX(Human 15-lipoxygenase) ELISA Kit 人15脂加氧酶 48T
69116 CETP(Human glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit 人*酯轉移蛋白 48T
69117 LTC4(Human Leukotriene C4) ELISA Kit 人白三烯C4 48T
69118 Cyt-C(Human Cytochrome-C) ELISA Kit 人* 48T
69119 LPL(Human lipoprotein lipase) ELISA Kit 人脂蛋白脂酶 48T
69120 GP-II(Human Glycogen phosphorylase II) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶II 48T
69121 GP-MM(Human Glycogen phosphorylase MM) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶MM 48T
69122 GP-BB(Human Glycogen phosphorylase BB) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶BB 48T
69123 Lp- Alpha(Human lipoprotein Alpha) ELISA Kit 人脂蛋白α 48T
69124 Cr(Human Crosslaps) ELISA Kit 人骨膠原交聯 48T
69125 C I CP(Human cross-linked C-opeptides of Type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型前膠原C末端肽 48T
69126 DPD(Human deoxypyridinoline) ELISA Kit 人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉 48T
69127 PY(Human pyridinium crosslink/PyriLinks) ELISA Kit 人吡啶交聯物 48T
69128 OPN(Human Osteopontin) ELISA Kit 人骨橋素 48T
69129 GABA(Human Gamma-aminobutyric acid) ELISA Kit 人γ氨基丁酸 48T
69130 SP-R(Human substance P receptor) ELISA Kit 人P物質受體 48T
69131 cGMP(Human Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit 人環磷酸鳥苷 48T
69132 Lp-PL-A2(Human lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit 人脂蛋白磷脂酶A2 48T
69133 EL(Human Endothelial lipase) ELISA Kit 人內皮脂肪酶 48T
69134 sm Actinin- Alpha(Human skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit 人橫紋肌輔肌動蛋白α 人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒 48T
69135 BMP-7(Human Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit 人骨成型蛋白7 48T
69136 25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3)ELISA Kit 人25羥基*3 48T
69137 LTB4(Human Leukotriene B4) ELISA Kit 人白三烯B4 48T
69138 iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人腸脂肪酸結合蛋白 48T
69139 OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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