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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
69761 Human apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit 人載脂蛋白B100 48T
69762 Human leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit 人白血病抑制因子受體 48T
69763 Human Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit *A 48T
69764 Human Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit *G 48T
69765 Human Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit *M 48T
69766 Human plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子1 48T
69767 Human plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子 48T
69768 Human Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit 人血纖蛋白原降解產物 48T
69769 Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 人血栓調節蛋白 48T
69770 Human plaet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 人血小板衍生生長因子 48T
69771 Human plaet activating factor,PAF ELISA Kit 人血小板活化因子 48T
69772 Human Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit 人組織型纖溶酶原激活劑 48T
69773 Human Tissue factor,IF ELISA Kit 人組織因子 48T
69774 Human Beta-Thromboglobulin, Beta-TG ELISA Kit 人β血小板球蛋白/β血栓環蛋白 48T
69775 Human Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 人血小板因子4 48T
69776 Human lymphocyte function associated antigen 2,LFA-2 ELISA Kit 人淋巴細胞功能相關抗原2 48T
69777 Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 人白三烯E4 48T
69778 Human D-Dimer,D2D ELISA Kit 人D二聚體 48T
69779 human Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit *E 48T
69780 Human Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,TREM-1 ELISA Kit 人髓系細胞觸發受體-1 48T
69781 Human leukoregulin,LR ELISA Kit 人白細胞調節素 48T
69782 Human Thrombopoietin,TPO ELISA kit 人血小板生成素 48T
69783 Human Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit 人白血病抑制因子 48T
69784 Human Salusin Alpha ELISA Kit 人Salusin-α 48T
69785 human Insulin receptor substrate 2,IRS-2 ELISA Kit 人胰島素受體底物2 48T
69786 Human transthyretin,TTR ELISA Kit 人轉甲狀腺素蛋白 48T
69787 Human advanced oxidation protein products,AOPP ELISA Kit 人晚期氧化蛋白產物 48T
69788 Human islet amyloid polypeptide,IAPP ELISA Kit 人胰島淀粉樣多肽 48T
69789 Human glycosylated serum protein,GSP ELISA Kit 人糖化蛋白 48T
69790 Human Glycated Albumin,GA ELISA Kit 人糖化白蛋白 48T
69791 Human Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA Kit 人甲狀腺結合球蛋白 48T
69792 Human advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit 人晚期糖基化終末產物 48T
69793 Human C-Polypeptide,CP ELISA Kit 人C多肽 48T
69794 Human Receptor for advanced glycation end products, RAGE/AGER ELISA Kit 人晚期糖基化終末產物受體 48T
69795 Human Glucagon,GC ELISA Kit 人胰高血糖素 48T
69796 Human Pancreatic Polypeptide,PP ELISA Kit 人胰多肽 48T
69797 Human insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit 人胰島素自身抗體 48T
69798 Human glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit 人*脫羧酶 48T
69799 Human Thymopentin,TP-5 ELISA Kit 人* 48T
69800 Human Thymosin ELISA Kit 人* 48T
69801 Human Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 ELISA Kit 人未磷酸化類胰島素生長因子結合蛋白-1 48T
69802 Human parathyroid hormone-like protein,PLP ELISA Kit 人甲狀旁腺激素樣蛋白 48T
69803 Human visfatin ELISA Kit 人內脂素/內臟脂肪素 48T
69804 Human apelin 12,AP12 ELISA Kit 人apelin 12 48T
69805 Human Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISA Kit 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 48T
69806 Human Proinsulin,PI ELISA Kit 人胰島素原 48T
69807 Human Insulin Receptor Beta,ISR- Beta ELISA KIT 人胰島素受體β 48T
69808 Human Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 人糖化血紅蛋白A1c 48T
69809 Human ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit 人胰高血糖素樣肽1 48T
69810 human thyroid stimulating immunoglobulin,TSI ELISA Kit 人甲狀腺刺激免疫球蛋白 48T
69811 human Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 人甲狀旁腺激素 48T
69812 human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA KIT 人甲肟前列腺素D2 48T
69813 human Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit 人高敏甲狀腺素 48T
69814 human ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit 人高靈敏度促甲狀腺激素 48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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