內容: 酶聯免疫吸附法（ELISA） 原理：ELISA可用于測定抗體，也可用于檢測杭原。其基本原理是采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接，然后通過酶與底物產生顏色反應，用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。3種必要的試劑： ①固相的抗原或抗體（免疫吸附劑）； ②酶標記的抗原或抗體（標記物）； ③酶作用的底物（顯色劑）。 ELISA過程包括：抗原吸附在固相載體上，這個過程稱為包被，加待測抗體, 再加相應酶標記抗體，生成抗原--待測抗體--酶標記抗體的復合物，再與該酶的底物反應生成有色產物。借助分光光度計的光吸收計算抗體的量。 根據檢測目的和操作步驟不同，有以下三種類型的常用方法：3.1間接法 此法是測定抗體zui常用的方法。將已知抗原吸附于固相載體。加人待檢標本（含相應抗體）與之結合。
洗滌后，加人酶標抗球蛋白抗體（酶標抗抗體）和底物進行測定。3.2雙抗體夾心法 此法常用于測定抗原。將已知抗體吸附于固相載體，加人待檢標本（含相應抗原）與之結合。溫育后洗滌，加人酶標板中。3.3競爭法 此法可用于抗原和半抗原的定量測定，也可用于測定抗體。
以測定抗原為例，將特異性抗體吸附于固相載體。加入待測抗原和一定量的酶標已知抗原，使二者竟爭與固相抗體結合；經過洗滌分離，zui后結合于固相的酶標抗原與待測抗原含量呈負相關。一、酶聯免疫吸附法測定抗體含量（競爭法）1、儀器設備酶聯免疫檢測儀（Bio－550）；酶標板 （96孔）；微量注射器。2、試劑（1）HRP標記羊抗兔Ig G（1:1 000，國產）；標準牛IgG；兔抗牛血清（1:256）；（2）包被液：0.05mol/L pH9.6碳酸緩沖液,4℃，保存, Na2CO3 0.15g, NaHCO3 0.293g,蒸餾水稀釋至100 mL。 （3）稀釋液與洗滌液：0.01mol/LpH7.4 PBS--Tween--20, ４℃，保存。NaCl 8g, KH2PO4 0.2g, Na2HPO4&12H2O 2.9g, Tween20，0.5mＬ。蒸餾水加至1000mＬ。（4）封
