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大鼠ELISA試劑盒的關鍵技術

閱讀:260發布時間:2015-8-3

    在建立大鼠ELISA試劑盒方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原 抗體 反應一般在37℃經1-2 小時,產物的生成可達。為避免蒸發,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,反應板不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。由于公司的 試劑 盒溫育是在空氣浴中完成,采用水浴會造成值偏高或花板。另外溫育中還有邊緣效應,邊上的值會偏高,建議為了客觀的判斷結果,將質控放在非邊緣位置。96孔酶標板結構特別;易產生邊緣效應,抗原抗體結合及酶促反應對溫度有嚴格要求,酶標板周圍與內部孔升降溫速率不同,造成周邊與內部孔結果差異;干浴與水浴存在明顯的差異,盡可能使用水浴,并要求固相板放入水中,減少受熱不均,貼密封膜,防止污物浸入。

洗滌在大鼠ELISA試劑盒過程中雖不是一個反應步驟,但卻決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗滌時應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。可以說在大鼠ELISA試劑盒操作中,洗滌是zui主要,應引起操作者的高度重視,操作者應嚴格按要求洗滌,不得馬虎。


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