親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每個分子由4個亞基組成，可以和4個*分子親密結合?，F在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和 素。*又稱維生素H，分子量244.31，存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物，ELISA試劑盒*-羥 基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成*化的產物。親和素與*的結合，雖不屬免疫反應，但特異性強，親和力大， 兩者一經結合就極為穩定。由于1個親和素分子有4個*分子的結合位置，可以連接更多的*化的分子，形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物 素與ELISA偶聯起來，就可大大提高ELISA試劑盒的敏感度。
因此結合于固相的酶標抗原量與ELISA試劑盒受檢抗原的量成反比。
(1)將特異抗體與固相載體連接，形成固相抗體。洗滌。
(2) 待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液，使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原，則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。如受檢標本中含有抗原，則 與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合，競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結合的機會，使酶標抗原與固相載體的結合量減少。參考管中只加酶標抗原，保溫 后，酶標抗原與固相抗體的結合可達zui充分的量。洗滌。
(3)加底物顯色：參考管中由于結合的酶標抗原zui多，ELISA試劑盒故顏色zui深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差，代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡，表示標本中抗原含量越多。
