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公司動態

牛抗苗勒管激素(AMH)ELISA試劑盒產品信息

閱讀:231發布時間:2014-12-2

產品名稱:牛抗苗勒管激素(AMH)ELISA試劑盒

別名:MIF,MIS,苗勒氏管抑制因子|苗勒氏管抑制物質

代碼:CSB-E13406B

大小:96T

種類:牛

目標名稱:抗苗勒管激素

縮寫:AMH

蛋白質生物過程:發展蛋白質

蛋白質生物過程:區別

檢測范圍:0.8ng/ml-200毫微克/毫升

靈敏度:0.8納克/毫升

檢測時間:1-5H

樣品體積:50-100ul

檢測wavelengt:450nm處

原理:

此法采用定量夾心酶聯免疫技術。抗體具體為AMH已經被預先涂到微孔板。標準和樣品吸入井,和AMH目前任何被綁定的固定抗體。*共軛的抗體特異性AMH除去任何未結合的物質后,加入到孔中。抗*蛋白共軛的辣根過氧化物酶(HRP)的洗滌后,加入到孔中。經過洗滌,以除去任何未結合的抗*蛋白的酶試劑,底物溶液加入到孔中,并顯色的比例AMH量的初始步驟中的約束。彩色顯影被停止并測量的顏色的強度。

Specificty:

此法具有靈敏度高,特異性好,檢測牛腎上腺髓質增生。牛腎上腺髓質增生及類似物之間并無重大交叉反應或干擾進行了觀察。

精度:

批內精密度(內檢測精度):CV%<8%

三種已知濃度的樣品進行了測試20次在一個平板上進行評估。

間精密度(精密檢測間):CV%<10%

已知的三個樣本20檢測到的濃度進行了測試評估。

樣品采集和存儲:

血清:使用血清分離管(SST)和全血標本在室溫下兩小時或4℃過夜℃,然后離心15分鐘,在1000×g下。刪除上清即可檢測,或分裝和店內樣品在-20°C或-80°C。但應避免反復凍融循環。

等離子:采集血漿中EDTA或肝素作為抗凝血劑。在2-8°C在30分鐘內收集離心15分鐘,1000×G。即可檢測,或分裝保存樣本在-20°C或-80°C。但應避免反復凍融循環。

檢測程序:

在使用前,將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測定前。據建議,所有樣品和標準來測定一式兩份。

1。準備好所有試劑,工作標準和樣品在前面的章節中。

2。請確定井數的使用,并把任何剩余的井和入袋干燥劑,密封保鮮袋,將未使用的井在4°C的含量布局表

。每孔加入100μl的標準和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時,在37℃下一盤布局記錄標準和樣品檢測。

4。每孔中取出的液體,不洗。

5。向每孔中加入100μl*抗體(1倍)。蓋上一個新的膠粘帶。孵育1小時,在37℃下(*抗體(1X)可能會出現混濁。預熱至室溫,輕輕混勻,直到出現均勻解決方案。)

6。吸液的各孔和洗滌,共洗滌三次重復該過程兩次。洗凈,每孔填充洗滌緩沖液(200μL)使用噴瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,靜置2分鐘,*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后,清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對干凈的紙巾。

7。向每孔中加入100μl的HRP-抗*蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一個新的粘接劑條。溫育1小時,在37℃下

8。重復的愿望/洗滌過??程中,在步驟6的5倍。

9。將90μlTMB底物添加到每個孔中。孵育15-30分鐘,在37℃下避光

10。一站式解決方案,每孔加入底物,輕輕晃動酶標板,以確保充分混合。

11。在5分鐘內,設置至450nm,使用酶標儀測定各孔的光密度。如果波長校正,設置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長在450nm處的讀數減去讀數。該減法校正板的光學缺陷。在450nm處未經修正讀數直接,可能會比較高,不太準確。

計算結果:

建議使用專業的軟“曲線專家1.3”的標準曲線,這可以從我們的下載。

平均每個標準和樣品的重復讀數和平均減去零標準的光學密度。

標準曲線,通過減少使用能產生四參數邏輯(4-PL)的曲線擬合的計算機軟件的數據。作為一種替代方法,建立標準曲線,對在y-軸的濃度通過繪制在x-軸為每個標準的平均吸光度,并繪制一個通過在曲線圖上的點的*擬合曲線。該數據可以通過繪制日志的AMH濃度與日志的OD和可以通過回歸分析確定的*擬合線線性化。此過程會產生足夠的,但不太的適合的數據。


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