人絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Braf(BRAF)ELISA試劑盒科研
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更新時間:2017-03-05 12:49:30瀏覽次數(shù):503次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子〖TWEAK〗elisa試劑盒,日日優(yōu)惠,月月*,年年低價,公司能提供各指標(biāo)、不同種屬、多種品牌、多種檢測方法ELISA試劑盒。
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人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子〖TWEAK〗elisa試劑盒利用抗原抗體之間專一性鍵結(jié)之特性,對檢體進(jìn)行檢測;由于結(jié)合于固體承載物(一般為塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍可具有免疫活性,因此設(shè)計其鍵結(jié)機(jī)制后,配合酵素呈色反應(yīng),即可顯示特定抗原或抗體是否存在,并可利用呈色之深淺進(jìn)行定量分析。根據(jù)待測樣品與鍵結(jié)機(jī)制的不同,ELISA可設(shè)計出各種不同類型的檢測方式,主要以夾心法(sandwich)、間接法(indirect)、以及競爭法(Competitive)三種為主。
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在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
,英文: Human tumour necrosis factor related weak inducer of apoptosis,TWEAK ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T ,別名: 人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子〖TWEAK〗ELISA試劑盒, 人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子〖TWEAK〗酶聯(lián)免疫試劑盒
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