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博研科研試劑網
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閱讀:526發布時間:2013-4-10
上海 博研科研試劑網為您提供“常用試劑的配制”咨詢!!
常用試劑的配制
1、抗體或免疫球蛋白稀釋液0.01mol/L pH7.2PBS
NaH2PO4·2H2O | 0.39克 |
Na2HPO4 | 1.27克 |
NaCl | 0.85克 |
NaN3 | 200mg |
H2O(蒸餾水) | 至 1000ml |
2、ELISA洗液及HRP標記抗體稀釋液PH7.4,PBST
NaCl | 2.0克 |
KH2PO4 | 0.2克 |
Na2HPO4·12H2O | 2.9克 |
KCl | 0.2克 |
NaN3 | 0.2克 |
H2O | 至 1000ml |
吐溫(Tween)20 | 0.5ml |
4°C保存備用 |
3、包被液(簡稱CB)pH9.6
Na2CO3 | 1.59克 |
NaHCO3 | 2.93克 |
NaN3 | 0.2克 |
H2O | 至 1000ml |
密封蓋好,4°C存放備用 |
4、ELISA底物液(可溶性底物)
磷酸-檸檬酸緩沖液pH5.0 | |
0.1mol/L檸檬酸(21.014克/100ml) | 24.3ml |
0.2mol/L Na2 HPO4(28.4克/1000ml) | 25.7ml |
H2O | 50ml |
4°C存放備用 |
常用試劑的配制5、DAB底物液(不溶性底物,組化病理等)
0.05mol/L pH7.6 Tris-HCL | |
Tris | 6.05克 |
HCL(36%) | 3.15克(約2.7ml濃HCL) |
H2O | 至 1000ml |
DAB為3´,3´二氧基聯苯胺,不溶性底物,呈棕紅色 |
6、DAB溶液配制:(組化及Western blot 顯色)
稱DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCL緩沖液100ml溶解,如有沉淀,過濾后使用,一般新鮮配制使用。
用前加入1%H2O2 1-1.5ml,H2O2濃度為0.01%,混均后使用。
7、3´,3´,5´,5´,-四甲基聯苯胺(TMB)溶液配制:
用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或無水乙醇,將TMB配成1%濃度,4°C保存半年以內使用。
使用前,用pH5.0磷酸-檸檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1%TMB液,再按每毫升TMB加入30%H2O2 1ul混勻后立即使用。
2N H2SO4終止后,450nm測定OD值。
8、1%離子瓊脂膠配制液
作免疫雙相擴散,單相擴散及免疫電泳中使用。
0.05UpH8.6巴比妥鈉-HCL緩沖液
巴比妥鈉 | 23.8克 |
1mol/L HCL | 34.5ml |
H2O | 2150ml |
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