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【產(chǎn)品名稱】：Anti-APPL1抗體,銜接因子蛋白含pH域磷酸*結(jié)合域和*拉鏈蛋白1抗體
【產(chǎn)品編號】：BYK-1632R
【產(chǎn)品規(guī)格】：0.1ml/0.2ml
【產(chǎn)品價格】：詢價（電詢或客服）
【抗體來源】：Rabbit OR Mouse
【產(chǎn)品用途】：科研實驗，用于免疫組化實驗，WB實驗，相應的標記抗體有HRP標記抗體，F(xiàn)ITC標記，BIO等。
【性 狀】： Lyophilized or Liquid
【濃 度】： 1mg/1ml
【亞 型】： IgG
【貯 存】： 貯存于-20℃.
【相關標記】：HRP Biotin Gold RBITC AP FITC Cy3 Cy5 Cy5.5 Cy7 PE PE-Cy3 PE-CY5 PE-CY5.5 PE-CY7 APC Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 647
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免疫組化操作流程
（一） 儀器設備
1. 18cm不銹鋼高壓鍋或電爐或用微波爐.
2. 水浴鍋
（二） 試 劑
1. PBS緩沖液（ph7.2―7.4）：NaC137mmol/L，KCl 2.7mmol/L ,Na2HPO4 4.3mmol/L,
KH2PO4 1.4mmol/L.
2．0.01mol/L檸檬酸鈉緩沖液（CB,ph6.0,1000ml）：檸檬酸三鈉3g,檸檬酸0.4g。
3．0.5mol/L EDTA緩沖液（ph8.0）：700ml水中溶解186.1g EDTA&
8226;2H2O,用10mmol/L
NaOH調(diào)至ph8.0,加水至1000ml.
4. 1mol/L的TBS緩沖液（ph8.0）：在800ml水中溶解121gTris堿，用1N的HCl調(diào)至ph8.0,加水1000ml。
5. 酶消化液：a. 0.1%*：用0.1%CaCl 12（ph7.8）配制。b.0.4%*液：用0.1N的HCl配制。
6. 3%甲醇―H2O2溶液：用30%H2O2和80%甲醇溶液配制
7. 風裱劑：a. 甘油和0.5mmol/L碳酸鹽緩沖液（ph9.0–9.5）等量混合
b 油和TBS（PBS）配制
8．TBS/PBS PH9.0–9.5,適用于熒光纖維鏡標本;ph7.0-7.4適合光學纖維標本。
（三） 操作流程
1 脫蠟和水化：脫蠟前應將組織芯片在室溫中放置60分鐘或60℃恒溫箱中烘烤20分鐘。 a 組織芯片置于二甲苯中浸泡10分鐘,更換二甲苯后在浸泡10分鐘
b 無水乙醇中浸泡五分鐘
c 95%乙醇中浸泡五分鐘
d 75%乙醇中浸泡五分鐘
2 抗原修復：用于福爾馬林固定的石蠟包埋組織芯片：
A 抗原熱修復
a 高壓熱修復 在沸水中加入EDTA（ph8.0）或0.01m*緩沖溶液（ph6.0）.蓋上不銹鋼鍋蓋，但不能鎖定。將玻片置于金屬染色加上，緩慢加壓，是玻片在緩沖液中浸泡五分鐘，然后將蓋子鎖定，小閥門將會升起來。10分鐘后除去熱源，置入涼水中，當小閥門沉下去后打開蓋子。此方法適用于較難檢測或核抗原的抗原修復。
b 沸熱修復 電爐或水浴鍋加熱0.01*緩沖液（ph6.0）至95℃左右，放入組織芯片加熱10-15分鐘。
C 微波爐加熱 在微波爐里加熱0.01*緩沖液（ph6.0）至沸騰后將組織芯片放入，斷電，間隔5-10分鐘，反復1-2次。適用的抗原：
Bcl-2.Bax.AR.PR.C-fos.x-jum.z-kit.c-myc.E-cadherin.
ChromograninA.Cyclin.ER.Heatshock.Protein.HPV.Ki-67.MDMZ.P53.P34.P15.P-glycoprotein.PKC.PCNA.ras.Rb.等
B 酶消化方法
常用0.1%*和0.4%*液。*使用前預熱37℃，消化時間約為5-30分鐘。適用于被固定遮蔽的抗原：包括 Collagen.GFAP.
Complement.Cytokeratin.C-erB-2.LCA.LN.等
3 免疫組化染色
SP法
（1） 脫蠟、水化 （2）PBS洗2-3次各5分鐘 （3）3%H2O2（80%甲醇）滴加在
TMA上，室溫靜置10分鐘 （4）PBS洗2-3次各5分鐘 （5）抗原修復
（6）PBS洗2-3次各5分鐘 （7）滴加正常山羊血清封閉液，室溫20分鐘，甩去多余液體（8）滴加Ι抗50μl,室溫靜置1小時或4℃過夜或37℃1小時（9）4℃過夜后需在37℃復溫45分鐘（10）PBS洗3次每次2分鐘
（11）滴加Ⅱ抗45-50μl,室溫靜置或37℃1小時（12）Ⅱ抗中可加入0.05%的
tween-20.（13）PBS洗3次各5分鐘（14）DAB顯色5-10分鐘，在顯微鏡下掌握染色程度 （15）PBS或自來水沖洗10分鐘 （16）蘇木精復染2分鐘，鹽酸酒精分化（17）自來水沖洗10-15分鐘 （18）脫水、透明、封片、鏡檢。
SABC法
（1） 脫蠟、水化 （2）PBS洗2次各5分鐘 （3）用蒸餾水或PBS配制新鮮的3%H2O2，室溫封閉5-10分鐘，用蒸餾水洗3次（4）抗原修復
（5） PBS洗5分鐘 （6）滴加正常山羊血清封閉液，室溫20分鐘，甩去多余液體（7）滴加Ι抗50μl,室溫靜置1小時或4℃過夜或37℃1小時
（8）PBS洗3次各2分鐘（9）滴加*化Ⅱ抗，20℃-37℃ 20分鐘
（10）PBS洗3次各2分鐘 （11）滴加試劑SABC 20℃-30℃ 20分鐘
（12） PBS洗4次各5分鐘 （13） DAB顯色：試劑盒或自配顯色劑顯色
（14）脫水、透明、封片、鏡檢。
