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PC-3M 2B4細(xì)胞，前列腺癌細(xì)胞低轉(zhuǎn)移亞系

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產(chǎn)品簡介

“PC-3M 2B4細(xì)胞，前列腺癌細(xì)胞低轉(zhuǎn)移亞系"品質(zhì)保障，咨詢，我們將竭誠為您服務(wù)，細(xì)胞一周質(zhì)保，出現(xiàn)任何質(zhì)量問題可免費(fèi)包換。！

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱：PC-3M 2B4細(xì)胞，前列腺癌細(xì)胞低轉(zhuǎn)移亞系

基本特性：
細(xì)胞數(shù)量：100萬個(gè)細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞傳代：到客戶手上是3代以內(nèi)的

細(xì)胞周期的DNA檢測

　　Ⅰ、樣品準(zhǔn)備　準(zhǔn)備以下一種或幾種樣品

　　A、組織單細(xì)胞懸浮液（如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細(xì)胞）

B、組織培養(yǎng)細(xì)胞

　　C、Ficoll-hypaque分離的單核細(xì)胞

　　Ⅱ、反應(yīng)體系－DNA低滲緩沖液

　　檸檬酸三鈉 0.25g

　　Triton-X 100 0.75ml

　　Propidium iodide 0.025g

　　核糖核酸酶　0.005g

　　蒸餾水　250ml

　　我們將該DNA低滲溶液于密閉瓶子中存放數(shù)月后并無發(fā)現(xiàn)有任何染色活性的丟失

　　Ⅲ、染色

　　1、每一個(gè)管子中放入1×106個(gè)細(xì)胞；

　　2、樣品離心后盡可能*地移去上清液，并且不要打碎沉淀塊；　　 3、入1ml的DNA低滲染色（可用甲基綠進(jìn)行染色）緩沖液至沉淀中，并混勻；

　 4、樣品于4℃下避光30分鐘或zui長不超過1個(gè)小時(shí)以備流式細(xì)胞儀分析。　

　注意：延長在低滲緩沖液的曝光時(shí)間會(huì)引起樣品碎片的增加。

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下面是有關(guān)細(xì)胞株，菌株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)：
1. 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺(tái)（laminar flow）以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺(tái)面，并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10 分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺(tái)面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。
2. 無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70 % ethanol 擦拭后才帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在臺(tái)面的*無菌區(qū)域，勿在邊緣的非無菌區(qū)域操作。
3. 小心取用無菌的實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45° 角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
4. 工作人員應(yīng)注意自身的安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于來自人類或是病毒感染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壍臒o菌操作臺(tái)（至少Class II）。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol 的產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖銳針頭的傷害等。
5. 定期檢測下列項(xiàng)目：
5.1. CO2 鋼瓶的CO2 壓力
5.2. CO2 培養(yǎng)箱的CO2 濃度、溫度、及水盤是否有污染（水盤的水用無菌水，每周更換）。
5.3. 無菌操作臺(tái)內(nèi)的airflow 壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng)，3000 小時(shí)/HEPA）。
6. 水槽可添加消毒劑（Zephrin 1:750），定期更換水槽的水.

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