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BT-474細(xì)胞,BT474人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

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產(chǎn)品簡介

“BT-474細(xì)胞,BT474人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞"品質(zhì)保障，咨詢，我們將竭誠為您服務(wù)，細(xì)胞一周質(zhì)保，出現(xiàn)任何質(zhì)量問題可免費(fèi)包換。！

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱：BT-474細(xì)胞,BT474人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

基本特性：
細(xì)胞數(shù)量：100萬個細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞傳代：到客戶手上是3代以內(nèi)的

細(xì)胞是一個獨(dú)立有序的、能夠進(jìn)行自我調(diào)控的結(jié)構(gòu)與功能體系。每一個細(xì)胞都具有一整套完整的裝置以滿足自身代謝的需要。單細(xì)胞生物能夠獨(dú)立地進(jìn)行全部的生命活動。在多細(xì)胞生物中，盡管每一個細(xì)胞的功能受到整體的協(xié)調(diào)與控制，但每一個細(xì)胞都是一個獨(dú)立的、自我控制的、高度有序的代謝系統(tǒng)，有相對獨(dú)立的生命活動，各種組織都是以細(xì)胞為基本單位來執(zhí)行特定的功能，整個機(jī)體的新陳代謝活動都是以細(xì)胞為單位協(xié)調(diào)地進(jìn)行的。
只要具備合適的生存條件，每一個分離的細(xì)胞都可以在體外生長繁殖，表現(xiàn)出生命的特征。
體外培養(yǎng)的細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿足細(xì)胞對營養(yǎng)成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求。

細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。
凍存液是20%FBS+10%DMSO+70%培養(yǎng)基。

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下面是有關(guān)細(xì)胞株，菌株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)：
1. 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺（laminar flow）以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10 分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個細(xì)胞株的操作。
2. 無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70 % ethanol 擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在臺面的*無菌區(qū)域，勿在邊緣的非無菌區(qū)域操作。
3. 小心取用無菌的實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45° 角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
4. 工作人員應(yīng)注意自身的安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于來自人類或是病毒感染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壍臒o菌操作臺（至少Class II）。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol 的產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖銳針頭的傷害等。
5. 定期檢測下列項(xiàng)目：
5.1. CO2 鋼瓶的CO2 壓力
5.2. CO2 培養(yǎng)箱的CO2 濃度、溫度、及水盤是否有污染（水盤的水用無菌水，每周更換）。
5.3. 無菌操作臺內(nèi)的airflow 壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng)，3000 小時(shí)/HEPA）。
6. 水槽可添加消毒劑（Zephrin 1:750），定期更換水槽的水.

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