無菌室建設的使用與管理
無菌室的要求
1.工作室應矮小、平整,面積只需4米2左右,高2.2—2.3米,內部裝修應平整、光滑,無凹凸不平或棱角等,四壁及屋頂應用不透水之材質,便于擦洗及殺菌。
2.室內采光面積大,從室外應能看到室內情況。
3.為保證無菌室的潔凈,無菌室周圍需設緩沖走廊,走廊旁再設緩沖間,其面積可小于無菌室。
4.無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜 ,其電源開關均應設在室外。
5.無菌室與緩沖間進出口應設拉門,門與窗平齊,門縫要封緊,兩門應錯開,以免空氣對流造成污染。
6.無菌室的使用與管理
（1）無菌室應保持清潔整齊,室內僅存放必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環、玻璃鉛筆等。&不要放與檢測無關的物品
（2） 室內檢驗用具及凳桌等保持固定位置,不隨便移動。
（3）每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面,然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣,zui后紫外燈殺菌半小時
（4）定期檢查室內空氣無菌狀況,細菌數應控制在10個以下,發現不符合要求時,應立即*消毒滅菌。/無菌室無菌程度的測定方法:取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養基平板各3個（平板直徑均9厘米）,置無菌室各工作位置上,開蓋曝露半小時,然后倒置進行培養,測細菌總數應置37℃溫箱培養48小時;測霉菌數則應置27℃溫箱培養5天。細菌`霉菌總數均不得超過10個為。
（5） 無菌室殺菌前,應將所有物品置于操作之部位（待檢物例外）,然后打開紫外燈殺菌30分鐘,時間一到,關閉紫外燈待用
（6） 進入無菌室前,必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。
（7） 操作應嚴格按照無菌操作規定進行,操作中少說話,不喧嘩,以保持環境的無菌狀態。
器材及場所的滅菌消毒
微生物檢驗用器材及場所必須進行滅菌或消毒處理,不同的對象采用不同的處理方法
1.高壓蒸汽滅菌:工作服、口罩、稀釋液等,置高壓殺菌鍋內,一般采用121℃滅菌半小時,當然不同的培養基有不同的要求,應分別處理。
2.火焰滅菌: 接種針、接種環等可直接火焰滅菌。
3.高溫干燥滅菌: 各種玻璃器皿、注射器、吸管等,置于燥箱中160℃滅菌2小時。
4.一般消毒:無菌室內的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進行滅菌,必須用其他方法進行消毒處理,采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒,工作人員的手也用此法進行消毒。
5.空氣的消毒: 開啟紫外燈照射30—60分鐘即可。
操作要領
準備工作
1.*行無菌室空間的消毒,開啟紫外燈30—60分鐘
2.檢驗用的有關器材, 搬入無菌室前必須分別進會滅菌消毒
3.操作人員必須將手清洗消毒,穿戴好無菌工作衣、帽和鞋,才能進入無菌室
4.進入無菌室后再一次消毒手部,然后才進行檢驗操作
操作過程注意事項
1.動作要輕,不能太快,以免攪動空氣增加污染;玻璃器皿也應輕取輕放,以免破損污染環境
2.操作應在近火焰區進行。
3.接種環、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒,灼燒時先通過內焰,使殘物烘干后再灼燒滅菌
4.使用吸管時,切勿用嘴直接吸、吹吸管,而必須用洗耳球操作。
5.觀察平板時不好 開蓋,如欲沾取菌落檢查時,必需靠近火焰區操作,平皿蓋也不能 大開,而是上下蓋適當開縫。
6.進行可疑致病菌涂片染色時,應使用夾子夾持玻片,切勿用手直接拿玻片,以免造成污染,用過的玻片也應置于消毒液中浸泡消毒,然后再洗滌。
7.工作結束,收拾好工作臺上的樣品及器材,zui后用消毒液擦拭工作臺。
