牛甘丙肽(GAL)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍：
96T
0.6ng/L – 20ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測定牛血清樣本中甘丙肽(GAL)含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中牛甘丙肽(GAL)。用純化的牛甘丙肽(GAL)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入甘丙肽 (GAL)，再與  HRP標(biāo)記的甘丙肽 (GAL)抗體    ，形成抗體 -抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TB 顯色。TB 在 HRP  酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的甘丙肽(GAL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中牛甘丙肽(GAL)濃度。
試劑盒組成
30倍濃
20ml×1瓶
6ml×1瓶
12孔×8條
6ml×1瓶
6ml×1瓶
6ml×1/瓶
終止液
6ml×1瓶
0.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
1份
2   酶標(biāo)試劑
標(biāo)準(zhǔn)品（40ng/L）
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3   酶標(biāo)包被板
4   樣品稀釋液
5   顯色劑 A液
6   顯色劑 B液
10   說明書
11   封板膜
12   密封袋
2張
1個(gè)
標(biāo)本要牛甘丙肽(GAL)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因   NaN3抑制辣根過（HRP）活性。
操作步驟
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
20ng/L
10ng/L
5ng/L
5號標(biāo)準(zhǔn)品
4號標(biāo)準(zhǔn)品
3號標(biāo)準(zhǔn)品
2號標(biāo)準(zhǔn)品
1號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  5號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  4號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  3號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150μl的  2號標(biāo)準(zhǔn)品加入  150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5ng/L
1.25ng/L
2.  加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。牛甘丙肽(GAL)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

溫育：用封板膜封板后37℃溫育30分鐘。30倍稀釋后備用
配液：將 30倍濃
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜重復(fù) 5次，拍干。30秒后棄去，如此
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
溫育：操作同 3。
洗滌：操作同 5。
顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液    50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應(yīng)在加終止液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總：
計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)， OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與  OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，