人乳腺癌細胞，MCF7細胞  cDNA文庫不同于基因組文庫，被克隆DNA是從mRNA反轉錄來源的DNA。CDNA組成特點是其中不含有內含子和其他調控序列。

從而做cDNA克隆時應是先從獲得mRNA開始，在此基礎上，通過反轉錄酶作用產生一條與mRNA相互補的DNA鏈，然后除掉mRNA，以*條DNA鏈為模板復制出第二條DNA鏈（雙鏈）；再進一步把此雙鏈插入原核或真核載體。

細胞庫細胞種類齊全，上信息發布數量有限，為了能及時快速確認您所需要的細胞是否提供，請*時間細胞庫管理員：（，）

Sepharose CL-4B凝膠過濾法分離cDNA]
Sepharose CL-4B柱的制備
1．用帶有彎頭的皮下注射針頭將棉拭的一半推進1ml滅菌吸管端部，用無菌剪刀剪去露在吸管外的棉花并棄去，再用濾過的壓縮空氣將余下的棉拭子吹至吸管狹窄端。
2．將一段無菌的聚氯乙烯軟管與吸管窄端相連，將吸管寬端浸于含有0.1 mol/L NaCl的TE（pH7.6）溶液中。將聚氯乙烯管與相連于真空裝置的錐瓶相接。輕緩抽吸，直至吸管內充滿緩沖液，用止血鉗關閉軟管。
人乳腺導管瘤細胞，BT-474細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人乳腺癌細胞，HCC1937細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人前列腺癌細胞，PC-3細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人乳腺癌細胞，ZR-75-30細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人乳腺癌細胞，MCF7細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人乳腺癌細胞，BC009細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人乳腺癌細胞，BC－020細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
3．在吸管寬端接一段乙烯泡沫管，讓糊狀物靜置數分鐘，放開止血鉗，當緩沖液從吸管滴落時，層析柱亦隨之形成。如有必要，可加入更多的Sepharose CL-4B，直至填充基質幾乎充滿吸管為止。
4．將幾倍柱床體積的含0.1 mol/L氯化鈉的TE(pH7.6)洗滌柱子。洗柱完成后，關閉柱子底部的軟管。
 
依據大小分離回收DNA
5．用巴斯德吸管吸去柱中Sepharose CL-4B上層的液體，將cDNA加到柱上（體積50μl或更?。?，放開止血鉗，使cDNA進入凝膠。用50μl TE(pH7.6)洗滌盛裝cDNA的微量離心管，將洗液亦加于柱上。用含0.1 mol/L NaCl的TE(pH7.6)充滿泡沫管。
6．用手提式小型探測器監測cDNA流經柱子的進程。放射性cDNA流到柱長2/3時，開始用微量離心管收集，每管2滴，直至將所有放射性洗脫出柱為止。
7．用切侖科夫計數器測量每管的放射性活性。
8．從每一管中取出一小份，以末端標記的已知大?。?.2kb~5kb）的DNA片斷作標準參照物，通過1%瓊脂凝膠電泳進行分析，將各管余下部分貯存于-20℃，直至獲得瓊脂糖凝膠電泳的放射自顯影片。
人乳腺癌細胞，BC－021細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人乳腺癌細胞，BC－022細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人包皮成纖維細胞，HFF細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人羊膜細胞，WISH細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人羊膜細胞，HA細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人胚胎干細胞，E1C4細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人卵巢癌細胞，A2780細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人宮頸癌細胞，H1HeLa細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人卵巢癌細胞，Caov-3細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
9．電泳后將凝膠移至一張Whatman 3MM濾紙上，蓋上一張Saran包裝膜，并在凝膠干燥器上干燥。干燥過程前20min至30min于50℃加熱凝膠，然后停止加熱，在真空狀態繼續干燥1~2h.
10．  置-70℃加增感屏對干燥的凝膠繼續X射線曝光。
11．  在cDNA長度≥500bp的收集管中，加入0.1倍體積的3mol/L乙酸鈉（pH5.2）和二倍體積的乙醇。于4℃放置至少15min使cDNA沉淀，用微量離心機于4℃以12 000g離心15min，以回收沉淀的cDNA。
12．  將DNA溶于總體積為20μl的10 mmol/L Tris-HCl(pH7.6)中。
人肺腺癌細胞 SPC-A1細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人肺癌細胞 A549細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人非小細胞肺癌細胞 H125細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人肺癌細胞 H1299細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人肺癌細胞 TKB-1細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人肺腺癌細胞，LTEP-a-2細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人肺腺癌細胞，Lu-165細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人大細胞肺癌細胞，NCI-H460細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人肺腺癌細胞，SPC-A-1細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人高轉移肺癌細胞，095-D細胞（T25培養瓶@密度75%）
人肺鱗癌細胞，SK-MES-1細胞（T25培養瓶@密度75%）
人大細胞肺癌細胞，NCI-H661細胞（T25培養瓶@密度75%）
13．  測定每一小份放射性活度。算出選定的組分中所得到的總放射性活度值。計算可用于λ噬菌體臂相連接的DNA總量。
[選定組分的總活度值(cpm)/摻入到第二鏈的活度值(cpm)]*2xμg cDNA第二鏈合成量=可用于連接的cDNA

人肺黏液上皮樣癌細胞，NCI-H292細胞 （T25培養瓶@密度75%）細胞說明書 
人肺退行性癌細胞，Calu-6細胞（T25培養瓶@密度75%）細胞說明書 
人肺腺癌細胞，NCI-H1395細胞（T25培養瓶@密度75%）細胞說明書 
人非小細胞肺癌細胞，NCI-H358細胞（T25培養瓶@密度75%）細胞說明書 
人非小細胞肺癌細胞，HCC827細胞（T25培養瓶@密度75%）細胞說明書 
人典型小細胞肺癌細胞，NCI-H1688細胞（T25培養瓶@密度75%）細胞說明書 
人非小細胞肺癌細胞，NCI-H1299細胞（T25培養瓶@密度75%）細胞說明書 
人胚肺二倍體細胞，2BS細胞（T25培養瓶@密度75%）細胞說明書 
人支氣管上皮樣細胞，BEAS-2B細胞
人乳腺癌細胞，Hs 578T細胞  （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人乳腺癌細胞，MDA-MB-468-06細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）