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白血病是造血系統的惡性腫瘤,在形態上變化雖相當大,但仍能表達正常血細胞所具有的抗原,因而仍可依據其抗原的表達譜對白血病進行免疫分型。由于白血病細胞具有腫瘤細胞的特征,其抗原表達又不*同于正常血細胞,常可出現某些抗原缺乏、過度表達、系列交叉表達某一系列或階段不應有的抗原,這又增加了白血病免疫分型的復雜性。elisa試劑盒
近年來白血病的免疫分型已成為診斷血液惡性腫瘤*的重要標準之一。ELISA試劑盒上*的通用的方法是流式細胞術(FCM),此外還有免疫組化法,電鏡和熒光顯微鏡也可以幫助診斷。其中流式細胞術(FCM)和免疫組化法較為常用。
elisa試劑盒流式細胞術中,白血病免疫分型是利用熒光素標記的單克隆抗體(McAb)作分子探針,多參數分析白血病細胞的細胞膜和細胞漿或細胞核的免疫表型,由此了解被測白血病細胞所屬細胞系列及其分化程度。因為FCM能快速,多參數,客觀的定性又定量測定細胞膜,漿,核的抗原表達。另一個重要理由是至今尚未發現白血病的特異抗原。所以能用正常血細胞的單抗來進行免疫分型是基于白血病形成的分化阻斷學說即白血病細胞基因異常,分化受阻于某階段形成不同亞型的白血病。這群細胞充盈于骨髓。抗原表達與其相應系列/階段的血細胞無明顯差異。與形態學檢查相似僅能根據數量的差異來判斷病變細胞的屬性。單參數免疫標志測定易將正常細胞包括在內。因此,近年來主張用設門(gating)方法。即用CD45與側向角(side scatter,SSC),對數取樣后可將骨髓細胞清晰地分出淋巴細胞,單核細胞,成熟粒細胞,幼稚細胞和紅細胞群,其理論依據是CD45是所有白細胞的抗原。ELISA試劑盒其表達量在淋巴細胞zui高,單核細胞,成熟粒細胞,早期造血細胞(blasts)依次減弱。紅細胞(中,晚幼紅細胞,成熟紅細胞)不表達CD45。SSC反映細胞的顆粒性,成熟粒細胞SSCzui高,依次為單核細胞,淋巴細胞,blasts,紅細胞。以CD45/SSC雙參數,對數取樣時即可把各細胞群區分出來。若同時加上一個,二個甚或三個熒光標記的單抗,則很容易識別非正常細胞群所表達的抗原。這樣可以排除正常細胞的干擾。在幼稚細胞%低的情況下或檢測殘存白血病時尤為必要。FCM分析白血病免疫表型時,測量細胞數量一般在10000~50000細胞之間,而且快速、特異、準確,重復性好,能區分細胞起源、劃分其分化發育階段等,對白血病的診斷與分型、治療方案選擇與預后判斷、發病機理研究等有重要價值。elisa試劑盒
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