
2017年08月28日 14:01上海邦景實業有限公司點擊量:480
干細胞注意事項
⒈ 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
⒉ 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
⑴ 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。當前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
⑵ 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
⑶ 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
⑷ 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是當前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
干細胞HOF 人卵巢成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
HAMSC 人羊膜間充質基質細胞 5 x 10^5 cells/vial
HCMSC 人絨毛膜間充質基質細胞 5 x 10^5 cells/vial
HMSC-bm 人骨髓間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial
HMSC-ad 人脂肪間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial
HMSC-hp 人肝臟間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial
HUMSC 人臍帶間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial
HPMSC 人肺間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial
HVMSC 人脊柱間充質干細胞 5 x 10^5 cells/vial
HUVEC 人臍靜脈內皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HUAEC 人臍動脈內皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HUVSMC 人臍靜脈平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
HUASMC 人臍動脈平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
RPC 大鼠垂體細胞 5 x 10^5 cells/vial
RMC 大鼠腦膜細胞 5 x 10^5 cells/vial
RN-r 大鼠腦脊神經元 1 x 10^6 cells/vial
RN-c 大鼠皮質神經元 1 x 10^6 cells/vial
RGC 大鼠顆粒細胞 1 x 10^6 cells/vial
RN-h 大鼠海馬神經元 1 x 10^6 cells/vial
RN-sn 大鼠黑質神經元 1 x 10^6 cells/vial
RN-s 大鼠紋狀體神經元 1 x 10^6 cells/vial
RN-vsc 大鼠腹脊髓神經元 1 x 10^6 cells/vial
RN-dsc 大鼠背脊髓神經元 1 x 10^6 cells/vial
ROPC 大鼠少突膠質前體細胞 5 x 10^5 cells/vial
RSC 大鼠雪旺細胞 5 x 10^5 cells/vial
RPNF 大鼠周神經成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
RA 大鼠星形膠質細胞 5 x 10^5 cells/vial
RA-c 大鼠小腦星形膠質細胞 5 x 10^5 cells/vial
RA-h 大鼠海馬趾星形膠質細胞 5 x 10^5 cells/vial
RM 大鼠小膠質細胞 5 x 10^5 cells/vial
RLF 大鼠淋巴成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
RPAEpiC 大鼠肺泡上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
RRTEpiC 大鼠腎小管上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
RHSteC 大鼠肝星形細胞 5 x 10^5 cells/vial
RCM 大鼠心肌細胞 1 x 10^6 cells/vial
RMSC 大鼠間充質干細胞-骨髓 5 x 10^5 cells/vial
MPC 小鼠垂體細胞 5 x 10^5 cells/vial干細胞
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