原代細胞原理與含義

2017年11月17日 15:31上海邦景實業(yè)有限公司點擊量：521

原代細胞原理與含義
ELISA試劑盒和抗體在體外特異后呈現(xiàn)的各種景象,對樣品中的抗原或抗體進行定性和定量檢查。本試驗選用雙抗體夾心ABC-ELISA法,用抗小鼠TNF-a單抗包被于酶標板上,規(guī)范品和樣品中的TNF-a與單抗,參加*化的抗小鼠TNF-a抗體,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶符號的鏈霉親和素(Streptavidin)與*,參加酶底物鄰苯二胺(OPD),呈現(xiàn)黃色,加停止液濃硫酸,色彩變深,在492nm處測OD值,TNF-a濃度與OD值成正比,可通過制作規(guī)范曲線求出標本中TNF-a濃度。它是樣品中蛋白質(zhì)含量檢查的定性和定量方法。
操作程序為：
(1)載體膜的預處理及抗原包被取硝酸纖維素膜用蒸餾水浸泡后，稍加單調(diào)進行壓圈。將陰性、陽性抗原及被查看抗原適度稀釋后參與圈中，置37℃使硝酸纖維素膜*單調(diào)。每張7cm×2.3cm的膜一般可點加40－53個樣品，每個壓圈可加抗原液1－20μl。
(2) 加酶標抗體，37℃反應一定時間后，用洗刷液洗三次。
(3)顯色參與新鮮的底物液，37℃反應一定時間后，去掉底物液，加蒸餾水洗刷中止反應。
(4) 關(guān)閉將硝酸纖維素膜置于關(guān)閉液中，37℃感作15－30分鐘。關(guān)閉液多選用富含正常動物血清、pH7.2或pH7.4的PBS。
(5) 加被檢血清可直接在抗原圈上加，也可剪下抗原圈、置于微量板孔中，再參與一定量適度稀釋的待檢血清，37℃反應一定時間，用洗刷液洗三次，每次1－3分鐘。洗刷液一般為一定濃度的PBS-Tween溶液。
(6) 效果判定以陽性、陰惡血清作為對照，膜片基地出現(xiàn)深棕赤色斑斕者為陽性反應，否則為陰性反應。
原代細胞HPMSC tRNA   人肺間充質(zhì)干細胞總RNA   10 µg
HMEpiC tRNA   人上皮細胞總RNA   10 µg
HMF tRNA   人成纖維細胞總RNA   10 µg
HUVEC tRNA   人臍靜脈內(nèi)皮細胞總RNA   10 µg
HUAEC tRNA   人臍動脈內(nèi)皮細胞總RNA   10 µg
HUVSMC tRNA   人臍靜脈平滑肌細胞總RNA   10 µg
HUASMC tRNA   人臍動脈平滑肌細胞總RNA   10 µg
HBMEC miRNA   人腦微血管內(nèi)皮細胞微小RNA   1 µg
HBCSMC miRNA   人腦血管平滑肌細胞微小RNA   1 µg
HBVP miRNA   人腦血管周細胞微小RNA   1 µg
HCPEC miRNA   人脈絡叢內(nèi)皮細胞微小RNA   1 µg
HCPEpiC miRNA   人脈絡叢上皮細胞微小RNA   1 µg
HCPF miRNA   人脈絡叢成纖維細胞微小RNA   1 µg
HMC miRNA   人腦膜細胞微小RNA   1 µg
HN miRNA   人神經(jīng)元微小RNA   1 µg
HCGC miRNA   人小腦顆粒細胞微小RNA   1 µg
HN-h miRNA   人海馬趾神經(jīng)元微小RNA   1 µg
HOPC miRNA   人少突膠質(zhì)前體細胞微小RNA   1 µg
HOPC-os miRNA   人少突膠質(zhì)前體細胞-懸浮生長微小RNA   1 µg
HSC miRNA   人雪旺細胞微小RNA   1 µg
HPC miRNA   人神經(jīng)束膜細胞微小RNA   1 µg
HA miRNA   人星形膠質(zhì)細胞微小RNA   1 µg
HA-c miRNA   人小腦星形膠質(zhì)細胞微小RNA   1 µg
HA-sp miRNA   人脊髓星形膠質(zhì)細胞微小RNA   1 µg
HA-h miRNA   人海馬趾星形膠質(zhì)細胞微小RNA   1 µg
HM miRNA   人小膠質(zhì)細胞微小RNA   1 µg原代細胞

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