RNA的結構學研究，比如X射線晶體衍射或者核磁共振（NMR），都需要制備毫克級的高純度RNA。
英國劍橋醫學研究委員會分子生物學實驗室的Laura Easton等開發出一種快速、大規模純化結構上均一的RNA的新方法。這種方法利用的是弱陰離子交換層析，它省略了上述這些繁瑣的步驟，更快速地純化大量RNA。文章發表在《RNA》雜志上。
整個過程如下：利用T7 RNA聚合酶對線性的質粒DNA進行轉錄之后，加入EDTA終止反應，并直接上樣到DEAE-Sepharose FPLC柱上。zui初的流出液含有T7 RNA聚合酶及rNTP。之后一次洗脫出短的中斷轉錄本、期望得到的RNA和質粒DNA。RNA的純度和均一性由分子排阻層析來驗證，而蛋白凝膠電泳證實了純化的RNA中不含T7 RNA聚合酶。
RNA的大量合成一般是利用T7 RNA聚合酶對DNA模板進行體外轉錄，不過隨后的純化非常困難且耗時。利用高速液相層析系統（FPLC）的分子排阻層析能夠從RNA產物中有效去除未摻入的NTP、中斷的小轉錄本及模板DNA，但是需要多個準備步驟，如酚/氯仿抽提，以去除T7 RNA聚合酶，以及脫鹽和樣品濃縮。
利用這種新方法，研究人員能夠在4小時內純化長度在30-500 nt的體外轉錄RNA，RNA的回收率達90%以上。如果單體RNA和低聚RNA有著足夠的電荷差異，那么也能將兩者區分開。
此技術既排除了酚/氯仿抽提，也不需要對RNA變性，不僅簡單省時，還能省錢。因為同位素標記的rNTP能夠很輕松地從柱流出液中回收利用，這樣又能節省一筆費用。
版權與免責聲明：
凡本網注明“來源：智慧城市網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-智慧城市網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：智慧城市網www.cmr6829.com”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
本網轉載并注明自其它來源（非智慧城市網www.cmr6829.com）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點或和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
-
免費注冊后，你可以
了解安防行業更多資訊查看安防行業供求信息凸顯安防行業自身價值
馬上注冊會員
-
想快速被買家找到嗎
只需要發布一條商機，被買家找到的機會高達90%！還等什么？
馬上發布信息
