
2019年04月17日 18:41武漢艾美捷科技有限公司點擊量:448
多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合PCR,它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應。其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同,但多重PCR和在很多應用中有巨大的優勢,深受分子診斷領域研究者與的喜愛:
1.高通量 (每個反應孔可分析更多樣本,產出顯著提高)
2.更低的樣本用量和試劑用量(特別適合樣品,降低成本)
3.更高的實驗精度,使加樣精度錯誤小化
目前多重PCR也面臨著一些問題:
1.PCR通常需要充分優化退火條件,以便對不同的引物–模板系統實現*效率的擴增。這種類型的PCR經常受到非特異性PCR產物的影響。嚴格的熱啟動程序和特別優化的緩沖溶液系統對于成功的多重PCR是非常關鍵的。
2.多重PCR所面對的另外一個挑戰是,不同的引物對之間,雜交動力學性質不同。結合效率更高的引物能更充分的利用PCR反應試劑,從而導致其它PCR產物的減少。這通常會導致一些本應該被擴增的產物沒有出現。有一些商業化的試劑盒經過特別的設計,可以避免這種情況。
Real-time RT-PCR可以通過一步法或者兩步法完成,兩者各有優劣。一步法快速的流程,可以迅速的處理多個樣本,并且易于實現自動化。操作步驟的減少提高了不同樣本結果的可重復性,并且由于減少了操作,降低了樣本被污染的風險。
為此,我們推薦使用Solis BioDyne研發的高靈敏度、高特異性、高穩定性的一步法多重PCR試劑盒-(基于探針),SOLIScript 1-step Multiplex Probe 試劑盒系列產品:
SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit | 08-55-00250 | 所有PCR儀器;但Applied BioSystems™和Agilent除外 |
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SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit (ROX) | 08-59-00250 | Applied BioSystems™ 和Agilent的PCR儀器 | ROX JUN Texas Red |
SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit (Purple) | 08-61-00250 | Applied BioSystems™ PCR儀器(需含Mustang Purple®通道) | Cy5 |
SOLIScript™ 1-step Multiplex Probe Kit(一步法多重PCR試劑盒-基于探針)可在同一個管子中高特異性的執行cDNA合成與基于探針的qPCR反應。更多優點如下:
1.的特異性:獨*改造的耐熱型逆轉錄酶,cDNA合成高達60℃。
2.多重反應(高通量):一個反應可同時分析1-4個靶標。
3.反應體系配置,無需冰塊:磚利的蛋白穩定技術,即使室溫保存有效期高達30天。
4.無懼高GC含量PCR:獨*優化的buffer配方。
5.預防交叉污染:內含dUTP,可匹配*糖苷酶(UNG)使用。
6.廣泛的設備兼容性:如上
試劑盒組分:
1.5x One-step Multiplex Probe Mix:
HOT FIREPol® DNA聚合酶,反應緩沖液, dNTPs(含dUTP), 15 mM MgCl2 (終濃度為3 mM MgCl2)
2.40x One-step SOLIScript Mix:
SOLIScript逆轉錄酶, RiboGrip RNase Inhibitor(RNase強效結合蛋白,抑制RNA降解)
3.Water(無核酸酶)
可靠的實驗結果展示:
對提取的人來源的總RNA進行5個濃度梯度的10倍稀釋(每個反應:4000pg/ul - 0.4pg/ul),各濃度樣品均使用Solis BioDyne的一步法多重PCR試劑盒,同時分析4個靶標。PCR儀器為:Applied BioSystems™ QuantStudio™ 6 cycler。
除了上述的的分子診斷研發神器,Solis BioDyne為客戶提供終點PCR(end-point PCR),qPCR(real-time PCR),反轉錄PCR(Reverse transcription),以及其它PCR所需的配套試劑。產品線縱覽圖如下:
Solis BioDyne來源于歐盟-愛沙尼亞共和國,自1995年以來,Solis BioDyne一直致力于開發和生產高品質的生命科學試劑,現已成為當今歐洲領*的試劑供應商之一。高標準的生產標準和服務使Solis BioDyne成為值得信賴的首*PCR供應商。我們的DNA聚合酶,PCR Master Mixes,qPCR Mixes和其它試劑被110多個國家的研究者所使用,包括頂*研究機構和生物技術公司。
Solis BioDyne擁有獨*的蛋白質穩定技術磚利,確保其PCR酶與PCR Mixes產品具有*的穩定性,研究者可以常溫運輸以及常溫下配置PCR反應體系(無需冰盒)。即使是室溫放置30天,其酶活性也沒有損耗。
作為Solis BioDyne在中國的區域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的Solis BioDyne產品以及訂制服務。
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