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這些問題才是導致 ELISA 測定結果出錯的元兇在哪里?

2019年06月28日 15:19上海撫生實業有限公司點擊量:229

                      這些問題才是導致 ELISA 測定結果出錯的元兇在哪里?
 

   上海撫生實業有限公司成立于2007年,經過數年的努力已迅速成為集科研和為一體的專業化生物工程公司。特別是ELISA,代測,技術服務這一產品已使上海撫生成為中國公司。

ELISA 的基本原理是:
①使抗原(或抗體)結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;
②使抗原(或抗體)與某種酶聯結成酶標抗原(或抗體),而且此酶標抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③ 測定時將受檢標本(抗體或抗原)和酶標抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進行反應,再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其 它物質分開,*后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應底物后,底物被酶催化后變為有色產物,根據其顏色反應的深淺 進行定性或定量分析,以了解被測標本中抗體或抗原含量。
ELISA 方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但 ELISA 測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在臨床檢驗中除正常反應外,有時常可見到一些錯誤結果(即假陽性或假陰性結果)。引起 ELISA 測定錯誤結果的原因主要有:①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
本文就標本因素對 ELISA 測定的影響做如下討論。
血清是*常用的 ELISA 標本,血漿一般可視為與血清同等的標本,標本引起的假陽性和假陰性結果主要是干擾性物質所致,分為內源性物質和外源性物質兩種:
1. 內源性物質
有人認為大約 40% 的人血清標本中含有非特異性干擾物質,可以不同程度影響檢測結果。常見的干擾物質有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫源性誘導的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應物質和其它物質等。
(1)類風濕因子
人血清中 IgM、IgG 型類風濕因子(RF)可以與 ELISA 系統中的捕獲抗體及酶標記二抗的 FC 段直接結合,從而導致假陽性。

 

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