2011年04月27日 09:34研域（上海）化學試劑有限公司點擊量：882
什么叫免疫熒光細胞化學？是根據抗原抗體反應的原理，先將已知的抗原或抗體標記上熒光素制成熒光標記物，再用這種熒光抗體（或抗原）作為分子探針檢查細胞或組織內的相應抗原（或抗體）。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有熒光素，利用熒光顯微鏡觀察標本，熒光素受激發光的照射而發出明亮的熒光（黃綠色或桔紅色），可以看見熒光所在的細胞或組織，從而確定抗原或抗體的性質、定位，以及利用定量技術測定含量。
用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法；用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術，以熒光抗體方法較常用。用免疫熒光技術顯示和檢查細胞或組織內抗原或半抗原物質等方法稱為免疫熒光細胞（或組織）化學技術。
免疫熒光細胞化學分直接法、夾心法、間接法和補體法。
什么叫免疫熒光細胞化學？免疫細胞化學（immunocytochemistry）是根據免疫學原理，利用抗體同特定抗原專一結合，對抗原進行定位測定的技術。抗原主要為大分子或與大分子相結合的小分子；抗體則是由漿細胞針對特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果將抗體結合上標記物，再與組織中的抗原發生反應，即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于組織中的部位。
標記抗體與抗原結合方式主要有兩種：①直接法：用標記抗體與抗體中的相應抗原直接結合，操作方法簡便，特異性高，但敏感性較差，此法可用于檢定未知抗原；②間接法：先用未標記的具有特異性的*抗體與樣品中的相應抗原結合，然后再以標記的第二抗體與特異性的*抗體結合；第二抗體是用*抗體作為抗原注入另一動物體內誘導產生的抗體，然后再結合以標記物。通過這樣的放大作用，使抗原分子上的標記物大大增多，故間接法較直接法的敏感性大為增高，約高5～10倍，故應用更為廣泛。間接法中較常用的，如過氧化物酶-抗過氧化物酶復合物法（peroxidase anti-peroxidase complexmethod， 標記方法PAP法），該法除需一抗和二抗外，還需要制備HRP標記的抗酶抗體,即以HRP作為抗原免疫動物，制成抗HRP抗體，再以HRP對標記該抗體，制成穩定的環形PAP復合物。標本先后經一抗、二抗和PAP復合物處理后再以DAB顯色抗原存在部位可見棕黃色產物。
10年來，免疫細胞學技術有了很大進展，各種新方法相繼建立。單克隆抗體（monoclonal antibody）制備技術極大地提高抗體的特異性與免疫組化染色的性。繼PAP法之后由于*-親合素等試劑的應用，為檢測微量抗原、受體、抗體提供了更的技術。
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