如何選擇二抗——根據(jù)一抗種屬及類型選擇合適的二抗
【一抗的種屬來源】
二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來源，例如：如果你的一抗是小鼠源的單克隆抗體，二抗則選抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是從兔血清里制備的兔源多克隆抗體，則相應(yīng)的二抗需要選擇抗兔的二抗。即根據(jù)一抗的物種來源選擇相應(yīng)的抗該物種的二抗。艾美捷能為您提供zui全的抗不同種屬的*二抗，包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、綿羊、人、豚鼠、豬、馬、牛、雞、鴨等二抗。
【一抗的類別亞型】
二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。這通常是針對單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白，因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體。其中單克隆抗體的類別及亞類通常會在產(chǎn)品說明書中都會有描述，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgM。如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合，或者你也可以選擇專門針對這一亞類的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以選擇抗IgG1的二抗，此種抗體在雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中尤其適合。在不清楚一抗為何種類/亞類的情況下，可以選用抗相應(yīng)物種IgG。艾美捷能為您提供通用的IgG（H+L）二抗，或者特異性只結(jié)合IgM的AntiIgM（mu）Antibody、IgA的AntiIgA（alpha-Antibody、IgE的AntiIgE（epsilon）Antibody等。
【二抗的種屬來源】
一般來說，不同的種屬來源與二抗的質(zhì)量沒有必然的，來源于山羊的二抗與來源于驢的二抗在一般的實(shí)驗(yàn)里沒有太多的差別。然而在一些特殊的實(shí)驗(yàn)里，如雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)里，如果其中一個一抗是山羊來源的，一個是小鼠來源的，則相應(yīng)的二抗分別要抗山羊和抗小鼠的二抗，這時候，二抗就不能選擇山羊或者小鼠來源的。艾美捷有相應(yīng)的驢來源的二抗，非常適合做類似雙標(biāo)的免疫實(shí)驗(yàn)。
【二抗的耦聯(lián)標(biāo)記】
一般來講，耦聯(lián)到二抗上的探針主要有酶（辣根過氧化酶HRP和堿性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），熒光基團(tuán)（FITC、Rhodamine、TexasRed、PE、Rhodamine、Dylight等）、*、金顆粒。選用哪種探針的二抗主要取決于具體的實(shí)驗(yàn)。對于WesternBlot和ELISA，zui常用的二抗是酶標(biāo)二抗；而細(xì)胞或組織標(biāo)記實(shí)驗(yàn)（細(xì)胞免疫化學(xué)，組織免疫化學(xué)，流式細(xì)胞術(shù)）中通常使用熒光基團(tuán)標(biāo)記的二抗，免疫組化中也可以使用辣根過氧化酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測信號，可以使用Biotin/Avidin檢測系統(tǒng)。在一些熒光檢測方案中，則需要選擇不同的熒光標(biāo)記；而金顆粒標(biāo)記的二抗則更多的應(yīng)用于免疫電鏡中。艾美捷能為您提供上述所有不同類型標(biāo)記的二抗。
【是否經(jīng)過血清吸附過的二抗】
為減少二抗與樣本的非特異性結(jié)合，艾美捷還能為您提供不同血清吸附的*二抗。如您的檢測樣本是人源的蛋白，一抗是小鼠源的單克隆抗體，二抗就需要選擇抗小鼠源的二抗，如果您對實(shí)驗(yàn)的特異性要求很高，那我們向您推薦經(jīng)過人血清吸附過的抗小鼠源的二抗，這種二抗由于經(jīng)過人血清吸附而排除了與人源組織（如IgG等）可能發(fā)生非特異性反應(yīng)的IgG，因此將非特異性結(jié)合降低到zui低。
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