2021年06月28日 00:53合肥萊爾生物科技有限公司點擊量：372
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
規格：100T/96S
產品內容：
試劑一：液體 34mL×1 瓶，4℃保存。每次用完用封口膜密封保存。
試劑二：液體 30mL×1 瓶，4℃保存。
標準品：粉劑×1 支，50mg 木質素，4℃保存。臨用前加入 1mL 高氯酸，充分混勻溶解，配成50mg/mL 的標準液。
產品說明：
木質素是構成植物細胞壁的成分之一，具有使細胞相連的作用。木質素存在于木質組織中，主要作用是通過形成交織網來硬化細胞壁，為次生壁主要成分。
木質素中的酚羥基發生乙酰化后在 280nm 處有特征吸收峰，280nm 的吸光值高低與木質素含量正相關。
試驗中所需的儀器和試劑：
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、可調式移液槍、研缽/勻漿器、EP 管、封口膜、高氯酸、冰乙酸和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣品處理：樣品 80℃烘干至恒重，粉碎，過 40 目篩，稱取約 3mg 于 1.5mLEP 管中。二、測定步驟：
1、分光光度計/酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 280nm，冰乙酸調零。
2、操作表：在 1.5ml玻璃管中依次加入下列試劑：
| 測定管 | 標準管 | 空白管 |
樣品（mg） | 3 | - | - |
試劑一（µL） | 300 | 300 | 300 |
高氯酸（µL） | 12 | - | 12 |
標準液（µL） | - | 12 | - |
封口膜密封，充分混勻。于 80℃水浴鍋水浴 40min，進行乙酰化。每隔 10min 震蕩一次， 然后自然冷卻。 | |||
試劑二（µL） | 300 | 300 | 300 |
充分混勻后于常溫 8000g 離心 10min，取上清。 | |||
上清液（µL） | 12 | 12 | 12 |
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三、木質素含量計算：
C 標準=C 原液×V 標準÷V 乙酰化×V 上清÷V 檢測=0.0196 mg/mL
木質素（mg/g）= △A÷（△A 標準÷C 標準）×V 檢測÷（W×V 上清÷V 乙酰化）
= 0.5998×△A÷△A 標準÷W
C 標準：標準液在最終檢測體系中的濃度，0.0196 mg/mL；C 原液：標準液濃度，50mg/mL；V 標準：加入的標準液的體積，0.012mL；V 乙酰化：乙酰化反應體積，0.612mL；V 上清：上清液體積，0.012mL；V 檢測：檢測反應總體積，0.6mL；W：樣本質量，g。1、試劑一有毒性，請操作時
注意事項：
1、做好防護措施，加熱前必須用封口膜密封，以防氣體溢出。
2、加熱過程中有劇烈反應，震蕩時輕搖，以免壓力過大噴出造成人身傷害。
3、冰乙酸具有強刺激性，建議操作過程全部在通風櫥內操作。
4、取上清加冰乙酸步驟根據自己樣品乙酰化程度，冰乙酸的用量可調整，保證吸光值在 0.1-0.8 之間即可，并在公式中參與計算。
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