ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應用,然而實驗新手們面對各種各樣、動則上上千種的ELISA試劑盒,真的不能分辨是不是自己想要的那個,也不知道應該怎么選擇合適的試劑盒。下面小編就為大家介紹一下如何選擇可靠又合適的ELISA試劑盒。
1.明確研究種屬。一般來說,廠家都會在產(chǎn)品名稱上標明種屬,且為第一個單詞,檢索種屬的常用語言為英文。如果您需對不同物種的同一因子進行定量,建議優(yōu)先尋找適用于多個種屬的ELISA試劑盒,產(chǎn)品介紹中會注明Multi-species。
2.要明確樣本類型。不同廠家驗證樣本類型不同,即使同一廠家不同試劑盒,其驗證樣本類型也不盡相同。特別是復雜的血漿樣本,根據(jù)樣本處理方式的差異,分為EDTA血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿,因此購買前需仔細核對。(如果您信賴廠家,也可以讓廠家推薦,大多數(shù)廠家比消費方要更熟悉試劑盒。)
3.要會預測自己的目標因子的濃度。一般來說,待測因子可以根據(jù)經(jīng)驗或資料獲得參考的檢測范圍,且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。如熱門炎癥因子IL-6,正常人血清中濃度為3.13pg/mL,病人會顯著增高,CAR-T回輸病人血清中的IL-6濃度甚至為正常人的200倍以上。因而,必要時進行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒極其重要。若濃度太低,可選擇高敏試劑盒;若不確定待測濃度或樣本間濃度差異較大,建議使用檢測動態(tài)范圍更寬的化學發(fā)光法ELISA試劑盒。
如果同樣為IL-6ELISA試劑盒,各類型檢測范圍差異較大,需要根據(jù)實際情況選擇合適的試劑盒。
4.跟廠家要他們?yōu)樵噭┖凶龅馁|(zhì)控的相關證明。質(zhì)控數(shù)據(jù)在說明書中即可找到,在購買前檢查試劑盒是否進行過嚴格的質(zhì)控實驗,包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實驗、線性稀釋實驗及交叉反應測試等,每個數(shù)據(jù)最好都看一下,確保*的結果重現(xiàn)性及準確性。
5.確定需檢測的因子數(shù)量。如果待測因子超過5個,且樣本量較小時,單因子ELISA檢測方法并不是*。建議考慮多因子檢測方法,如固相芯片(樣本數(shù)量一般5個以內(nèi),檢測指標可達上百個)及Luminex液相芯片方法(檢測樣本多達80個,檢測指標多達50個)或微流控ELISA檢測系統(tǒng)Ella。可節(jié)約樣本及時間成本,也可保證檢測結果準確。
6.根據(jù)您的預算選擇產(chǎn)品。不要一味的追求低價,應當在您的預算范圍內(nèi)選擇更合適的試劑盒。生物學是極其嚴謹?shù)目茖W,一致性的實驗結果是基金、文章等評審過程中不可少的因素,即使低廉的價格,不能夠重現(xiàn)好的結果,也是資源的另一種浪費。