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黃曲霉毒素B1檢測(cè)卡的實(shí)驗(yàn)步驟

2022年04月13日 13:20廣州健侖生物科技有限公司點(diǎn)擊量：1097

需要設(shè)備及耗材：

1、儀器：均質(zhì)器 、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）。

2、微量移液器：?jiǎn)蔚?0µl-200µl，100µl-1000µl。

3、試劑：甲醇，正己烷。

樣本準(zhǔn)備：

1、樣本處理前須知：實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2、配液：配液1：樣本提取液    70%甲醇，即V甲醇:V去離子水=7:3。

3、樣本前處理步驟：

3.1 谷物、飼料

1）稱取2g粉碎樣本于離心管中，再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液

檢測(cè)下限

10ppb

20ppb

40ppb

100ppb

樣本提取液

2ml

4ml

8ml

20ml

振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。

2）取0.1ml上清，加入0.4ml去離子水，混勻備用。

3.2谷物、飼料（須吹干）

 若要求檢測(cè)下限為5ppb時(shí)，可按如下操作：

1）稱取2g粉碎樣本于離心管中，加入4ml樣本提取液，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘；

2）取1ml上層液體在50-60℃條件下用氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/p>

3）先加入0.25ml 70%甲醇溶解剩下的殘留物，劇烈震蕩2分鐘；再加入1ml去離子水，混勻備用。（注意：這一步甲醇與水的加液順序不能顛倒）

         稀釋倍數(shù)：2.5倍     檢測(cè)下限：5ppb

3.3糧油（菜油、麻油、色拉油、花生油等）

1）稱取2g樣本于離心管中，再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液

檢測(cè)下限

10ppb

20ppb

40ppb

100ppb

樣本提取液

2ml

4ml

8ml

20ml

然后加入8ml正己烷，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。

2）去除上層液體，取0.1ml下層液體加入0.4ml去離子水，混勻備用。

實(shí)驗(yàn)步驟：

1、 撕開檢測(cè)卡鋁箔包裝袋，取出檢測(cè)卡，放于平整、潔凈的臺(tái)面上。

2 、用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本液體，緩慢、逐滴的（應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生）滴加4-5滴（約150ul）到加樣孔（S）內(nèi)。

3 、室溫下放置5-8分鐘判斷結(jié)果，超過(guò)30分鐘的結(jié)果無(wú)效。

結(jié)果判斷：

1.陰性：在觀察孔內(nèi)，只有對(duì)照線區(qū)（C）出現(xiàn)一條紫紅色線。

2.陽(yáng)性：在觀察孔內(nèi)，檢測(cè)線區(qū)（T）及對(duì)照線區(qū)（C）同時(shí)出現(xiàn)紫紅色線。抗體滴度越高，檢測(cè)線（T）顏色越深。

3.失效：在觀察孔內(nèi)，對(duì)照線區(qū)（C）不出現(xiàn)紫紅色線。(注: 去離子水、自來(lái)水、生理鹽水不能作為陰性對(duì)照。)

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