
2022年12月27日 13:55上海古朵生物科技有限公司點擊量:1100
【古朵生物】革蘭氏染色法 染色原理
革蘭氏染色法可將所有的細菌區分為革蘭氏陽性菌(G+)和革蘭氏陰性菌(G-)兩大類,是細菌學上常用的鑒別染色法。該染色法之所以能將細菌分為G+菌和G-菌,是因為一般認為革蘭氏染色是基于細菌細胞壁特殊化學組分進行染色的。
通過初染和媒染后,細胞內形成了不溶于水的結晶紫一碘大分子復合物。革蘭氏陽性細菌由于細胞壁較厚、肽聚糖含量較高和其分子交聯度較緊密,故在用乙醇洗脫時,肽聚糖網孔會因脫水而明顯收縮,加上它基本不含類脂,故乙醇處理不能在壁上溶出縫隙,因此,結晶紫與碘復合物仍牢牢阻留在細胞壁內,使其呈現紫色。而革蘭氏陰性細菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交聯松散,故遇乙醇后,肽聚糖網孔不易收縮,加上它類脂含量高,所以當乙醇把類脂溶解后,在細胞壁上就會出現較大縫隙,復合物容易溶出細胞壁,因此通過乙醇脫色后,細胞又成無色。這時再用紅色染料進行復染,革蘭氏陰性細菌將獲得一層新的顏色--紅色,而革蘭氏陽性菌則仍呈紫色。
革蘭氏染色反應是細菌分類和鑒定的重要性狀。它是1884年由丹麥醫師Gram創立的。革蘭氏染色法不僅能觀察到細菌的形態而且還可將所有細菌區分為兩大類:染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌,用G+表示;染色反應呈紅色(復染顏色)的稱為革蘭氏陰性細菌,用G-表示。細菌對于革蘭氏染色的不同反應,是由于它們細胞壁的成分和結構不同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網狀結構組成的,在染色過程中,當用乙醇處理時,由于脫水而引起網狀結構中的孔徑變小,通透性降低,使結晶紫-dian復合物被保留在細胞內而不易脫色,因此,呈現藍紫色;革蘭氏陰性細菌的細胞壁中肽聚糖含量低,而脂類物質含量高,當用乙醇處理時,脂類物質溶解,細胞壁的通透性增加,使結晶紫-dian復合物易被乙醇抽出而脫色,然后又被染上了復染液(番紅)的顏色,因此呈現紅色。
革蘭氏染色需用四種不同的溶液:堿性染料初染液;媒染劑;脫色劑和復染液。堿性染料初染液的作用象在細菌的單染色法基本原理中所述的那樣,而用于革蘭氏染色的初染液一般是結晶紫。媒染劑的作用是增加染料和細胞之間的親和性或附著力,即以某種方式幫助染料固定在細胞上,使不易脫落,dian(iodine)是常用的媒染劑。脫色劑是將被染色的細胞進行脫色,不同類型的細胞脫色反應不同,有的能被脫色,有的則不能,脫色劑常用95%的酒精(ethanol)。醫學教.育網搜集整理復染液也是一種堿性染料,其顏色不同于初染液,復染的目的是使被脫色的細胞染上不同于初染液的顏色,而未被脫色的細胞仍然保持初染的顏色,從而將細胞區分成G+和G-兩大類群,常用的復染液是番紅。
革蘭氏染色法 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區,我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。
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