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【古朵生物】ELISA試劑盒的操作方法、注意事項和優(yōu)勢

2023年06月16日 14:38上海古朵生物科技有限公司點擊量：583

　　【古朵生物】ELISA試劑盒的操作方法、注意事項和優(yōu)勢


　　ELISA Kit通稱為ELISA試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種靈敏度高，特異性強，重復性好的實驗方法，且因其試劑穩(wěn)定，易保存，耗時短，操作簡便，結(jié)果判斷客觀等優(yōu)點，已被廣泛應(yīng)用于免疫學檢驗的各領(lǐng)域中，得到科研工作者的認可。

　　ELISA是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附試驗的標準程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體(capture Ab)固定在固相載體上，再加入一級檢測抗體(primarydetection Ab)，形成一個抗原抗體的復合物。如果該抗體已經(jīng)用酶(enzyme)標記了，即可用來直接測定抗原的量，若無，則可利用另一個酶標記的二級抗體來測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)(substrate)，作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關(guān)系，依此原理計算出樣本中的抗原總量或濃度。

　　產(chǎn)品優(yōu)勢：

　　1.采用高效、靈敏、特異的抗體。

　　2.易保存、耗時短、操作簡便、性價比高。

　　3.穩(wěn)定的重復性和可靠性，線性范圍好。

　　4.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體。

　　5.適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種標本類型。

　　ELISA試劑盒操作方法：

　　1.標準品的稀釋，請按照說明書進行操作。

　　2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

　　3.加樣：不規(guī)范的移液操作可能帶來誤差。

　　1)空白孔，空白對照孔不加樣品，sws標記的抗體，鏈霉親和素-HRP，只加顯色劑A&B和終止液，其余各步操作相同;

　　2)標準品孔：加入標準品50ul，鏈霉親和素-HRP50ul(標準品中已事先整合好抗體，故不加);

　　3)待測樣品孔：加入樣本40ul，然后各加入抗NE抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul，蓋上封板膜，輕輕震蕩混勻，37℃溫育60分鐘。

　　4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

　　5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

　　6.顯色：每孔先加入顯色劑A50ul，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

　　7.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

　　8.測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進行。

　　9.根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標準曲線的回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。

　　10.僅供參考，以試劑盒內(nèi)實際說明書為準。

　　Elisa試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。


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