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2023年09月21日 14:49上海古朵生物科技有限公司點(diǎn)擊量:737
姬姆薩染色法的操作步驟及注意事項(xiàng)
姬姆薩染色法簡稱姬氏染色,是用天青色素、伊紅、次甲藍(lán)混合而成的姬姆薩染料對(duì)血液涂抹標(biāo)本、血球、瘧原蟲、立克次體以及骨髓細(xì)胞、脊髓細(xì)胞等標(biāo)本進(jìn)行染色的染色方法。染前用蛋白酶等進(jìn)行處理,然后再用姬姆薩染液染色,在染色體上,可以出現(xiàn)不同濃淡的橫紋樣著色。姬姆薩染液可將細(xì)胞核染成紫紅色或藍(lán)紫色,胞漿染成粉紅色,在光鏡下呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞及染色體圖像。
作用機(jī)理:
姬姆薩染色液由天青,伊紅組成。染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì),細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,染紫藍(lán)色,稱為嗜堿性物質(zhì),中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,染淡紫色,稱為中性物質(zhì)。
PH對(duì)細(xì)胞染色有一些影響。細(xì)胞里各種成分均不蛋白質(zhì),因?yàn)榈鞍踪|(zhì)系兩性電解質(zhì),帶電荷隨溶液PH而定,在偏酸性環(huán)境里下在電荷增多,易和伊紅結(jié)合,染色為偏紅,在偏三性環(huán)境里負(fù)電荷增多,易和美藍(lán)或天青結(jié)合,染色偏藍(lán)。所以細(xì)胞染色對(duì)氫離子濃度十分敏感,染色用正經(jīng)片一定清潔,要無酸堿污染。配制頊特液一定用優(yōu)質(zhì)甲醇,稀釋染色一定用緩沖液,沖洗一定用水應(yīng)近中性,不然可導(dǎo)致各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常,以致于識(shí)別困難,甚至造成錯(cuò)誤的。一般性操作技術(shù)血涂片制備、細(xì)胞染色、顯微檢查、血液病診斷、染色不良。
操作步驟:
1、滴加姬姆染色液A液(0.5-0.8ml)于涂片上,并讓染液覆蓋整個(gè)標(biāo)本涂色片染色1分鐘。
2、將姬姆薩染色液B液滴加于A液上面(滴加之量為A液的2-3倍)以洗耳球吹出微風(fēng)使液面產(chǎn)生漣漪狀,使兩液充分混合,染色3-10分鐘。
3、水洗(沖洗時(shí)不能先倒掉染液,應(yīng)以流水沖去,以防有沉渣沉淀在標(biāo)本上)。
4、干燥,鏡檢。
注意事項(xiàng):
1、染色時(shí)間要視何種標(biāo)本,涂片薄厚,有核細(xì)胞多少,何種細(xì)胞及溫室等而定;通常染血液涂片時(shí)滴加B液后染1-3分鐘即可,染骨髓片則應(yīng)不少于5分鐘。
2、做骨髓涂片時(shí)因?yàn)楣撬枥w維蛋白含量較高,凝固較快,所以涂片過程要快。
骨髓不可用草酸鹽抗凝,否則會(huì)使血細(xì)胞核變形,核染色質(zhì)致密,胞質(zhì)空泡形成,出現(xiàn)草酸鹽結(jié)晶。
3、染液量需充足,勿使染液蒸發(fā)干燥,以防染液沉著于涂片上。
4、做血細(xì)胞染色時(shí),當(dāng)天氣寒冷或濕度較大時(shí),應(yīng)于37T溫箱中保濕促干,以免細(xì)胞變形縮小。
姬姆薩染色法上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量”的方針。
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