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ACP核酸檢測(PCR熒光探針法)

2023年10月21日 12:45通派(上海)生物科技有限公司點擊量:574

ACP核酸檢測(PCR熒光探針法)

 

實驗目的:檢測動物肺臟、淋巴結等組織中鸚鵡熱衣原體(ACP)DNA,用于鸚鵡熱衣原體(ACP)感染的輔助診斷及流行病學調查。其檢測結果僅供參考。

 

實驗方法:選取一對ACP特異性引物和一條特異性熒光探針,應用堿裂解法提取DNA,在耐熱DNA聚合酶(Taq酶)作用下,配以FQ-Buffer(內含Mg2+Tris-HCl)、四種核苷酸單體(dNTPs)等成分,通過PCR-熒光探針體外擴增法對鸚鵡熱衣原體(ACP)一段高保守區域進行擴增,從而達到快速實時定量檢測之目的。

 

動物組織標本采集:取發病動物肺臟、淋巴結等組織1g左右,轉至1.5ml離心管中,密閉送檢。

 

提取組織:取約100mg組織加1ml生理鹽水,研磨成組織勻漿,取50ul勻漿液轉至一潔凈的1.5ml離心管中。

 

組織DNA提取:向標本中加入50ul核酸提取液充分混勻,100℃烈解10min13,000rpm 離心3min,取上清液4ulPCR反應。


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