2023年10月29日 19:57通派（上海）生物科技有限公司點擊量：1187
ADV核酸檢測實驗
實驗目的：檢測動物血清或血漿、肝、脾、淋巴結組織等樣本中(ADV)DNA，其檢測結果僅供臨床參考。
實驗原理：選取一對(ADV)特異性引物和一條特異性熒光探針，應用堿裂解法提取DNA，后者在耐熱DNA聚合酶(Taq酶)作用下，配以FQ-Buffer(內含MgP2+P、Tris-HCl等)、四種核苷酸單體(dNTPs)等成分，通過PCR-熒光探針體外擴增法對(ADV)進行擴增，從而達到快速實時定量檢測之目的。
適用標本類型：疑似動物血清或血漿、肝、脾、淋巴結組織和咽拭子等樣本。
標本采集：
血清：用無菌注射器抽取受檢動物靜脈血2毫升，注入無菌5ml干燥管(或含促凝劑)，立即輕輕顛倒管子混合5至10次，密閉送檢。
肝、脾、淋巴結等組織：取可疑部位組織1g，轉至一潔凈的1.5ml的離心管中，密閉送檢。
保存和運輸：標本可立即用于測試， 2-8℃保存下不應超過24小時； -70℃以下長期保存。避免反復凍融。標本運送時應采用0℃冰壺。
1.（標本預處理）血清、血漿等液體標本：吸取液體標本100ul至新的潔凈的1.5ml離心管，加入100ul核酸提取液A，13,000rpm離心3min，去上清保留約50ul沉淀。
2.（標本預處理）肝、脾、淋巴結等組織：用適量滅菌生理鹽水清洗送檢的組織的血液；取大約100mg的組織，加入1ml的滅菌生理鹽水用勻漿研磨成組織漿，移至新的1.5ml離心管，13,000rpm離心5min，去上清留沉淀；
DNA提取：向上述標本中加入50μl核酸提取液B充分混勻，100℃烈解10min。13,000rpm 離心3min，備用。
陰性質控品：取50ul陰性質控品，加50ul核酸提取液B充分混勻(提取液用前需室溫溶解并充分混勻)后100℃10分鐘，13,000rpm離心3分鐘，取上清液4ul做PCR反應。
ADV陽性質控品：直接取4ul進行PCR擴增，或按照PCR擴增介紹方法進行定量分析。
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