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革蘭氏染色與細菌抗酸染色技術操作技巧分享

2023年11月01日 11:49上海遠慕生物科技有限公司點擊量:654

  蘭氏染色和抗酸染色都屬于細菌形態學檢查法,提到革蘭氏染色大家肯定都非常熟悉,但是說到抗酸染色你不一定了解。今天我們進入細菌的世界,聊一聊細菌界的這兩大染色法:

  革蘭氏染色(Gram stain)

  用途:由丹麥病理學家Christain Gram于1884年創立,直到現今,革蘭氏染色法仍是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法。通過革蘭氏染色,可將細菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。

  原理:細菌經龍膽紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內形成了不溶于水的龍膽紫與碘的復合物,革蘭氏陽性菌(G+)由于其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯致密,故遇乙醇脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙,因此,能把復合物牢牢留在壁內,使其仍呈藍紫色;而革蘭氏陰性菌(G-)因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差,在遇脫色劑后,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網不能阻擋復合物的溶出,因此通過乙醇脫色后仍呈無色,再經紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

  染色結果:

  革蘭陽性菌(G+):藍色

  革蘭陽性菌(G+):紅色

  其他組織:黃色

  細胞核:紅色

  抗酸染色(Acid Fast Bacteria (AFB) Stain)

  用途: 由埃利希(F.Ehrlich)1882年shou創,并經F.齊爾(Ziehl)改進而創造出的細菌染色法,用于細菌標本涂片或菌落涂片的染色,目前常用于對分枝桿菌屬進行初步鑒別。

  原理: 分枝桿菌的細胞壁內含有大量的脂質(主要成分為分枝菌酸),包圍在肽聚糖的外面,具有抗酸性,染色時與石炭酸復紅結合牢固,能抵抗酸性乙醇的脫色作用,,因此抗酸菌能保持復紅的顏色,達到染色目的。未脫色細菌呈紅色為抗酸性細菌,脫色經復染呈藍綠色的細菌為非抗酸性細菌。

  染色結果:

  抗酸菌組織:紅色

  其他細菌及背景:淺綠色

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