技術資料| 改良吉姆薩染色液(20X)

　　改良吉姆薩染色液(Modified Giemsa Staining Solution)，也稱瑞氏-吉姆薩染色液(Wright-Giemsa Staining Solution)，是用于細胞、血液、骨髓涂片或組織切片等樣品染色的染色液。根據細胞成分的化學性質，改良吉姆薩染色液可將細胞質染成粉紅色或藍色，將細胞核染成紫紅色或藍紫色。在光學顯微鏡下呈現出清晰的細胞及染色體圖像，便于對細胞內部結構的觀察及異常變化的識別。

　　吉姆薩染色(Giemsa stain)，又稱姬姆薩染色，是以德國化學家、細菌學家Gustav Giemsa的名字來命名的，最初是用于瘧疾病人體內寄生蟲的診斷，后由于對染色質和細胞核膜的高質量染色而用于組織病理學和細胞遺傳學。吉姆薩染色對細胞質著色較好，結構顯示清晰，但細胞核著色較深，核結構顯示不佳。吉姆薩染色原理和結果與瑞氏染色基本相同，而改良吉姆薩染色法是將吉姆薩染色法與瑞氏染色法結合，兼顧二者之長，使細胞質和細胞核均能獲得滿意的染色效果。改良吉姆薩染色液、吉姆薩染色液和瑞氏染色液三種染色液的比較如下：

　　產品名稱改良吉姆薩染色液(20X)吉姆薩染色液(10X)瑞氏染色液

　　產品編號C0131C0133C0135

　　主要成分天青B、天青II-伊紅、亞甲基藍天青II和伊紅亞甲基藍和伊紅

　　細胞質顏色粉紅色或藍色粉紅色或藍色粉紅色或藍色

　　細胞核顏色紫紅色或藍紫色紫紅色或藍紫色紫紅色

　　特點將吉姆薩染色和瑞氏染色結合起來，彌補了兩者各自的缺點對細胞質著色力較強，但細胞核著色較深，細胞核結構顯示不佳細胞質及其中顆粒染色較好，但細胞核染色質及核膜的結構不是很清晰

　　用途主要用于細胞、血液、骨髓涂片或組織切片的染色主要用于染色體顯帶、寄生蟲和血細胞的染色主要用于血細胞的染色

　　改良吉姆薩染色液的主要成分是天青B (azure B)、天青II-伊紅(azure II-eosin)和亞甲基藍(methylene blue)。其中天青B是一種堿性染料(陽離子染料)，常用于染色體或核酸的染色;伊紅是酸性染料(陰離子染料)，是以氧雜蒽和醌式苯環作為生色基團，以羧基(-COOH)為助色基團的染料;亞甲基藍是堿性染料(陽離子染料)，生色基團包括偶氮基(-N=N-)等。染色原理是基于在酸性染料中具有染色作用的陰離子與細胞內的堿性物質相結合，而堿性染料中具有染色作用的陽離子與細胞內的酸性物質相結合。各種細胞成分化學性質不同，對各種染料的親和力也不一樣。細胞核蛋白主要與天青II和伊紅形成的化合物結合，使細胞核呈紫紅色。各類成分由于自身特性與改良吉姆薩染液中不同物質結合呈現不同顏色從而得以區分。在對其它細胞染色時，代謝旺盛的細胞胞質含較多蛋白質呈酸性，因此與天青II和伊紅形成的化合物結合呈粉紅色。血細胞在本染色液染色后的細胞質顏色見下表：

　　血細胞類型細胞質顏色

　　成熟紅細胞(Mature red blood cells)粉紅色

　　嗜酸性粒細胞(Eosinophils)粉紅色

　　嗜堿性粒細胞(Basophils)藍紫色

　　中性粒細胞(Neutrophils)淡紫紅色

　　單核細胞(Monocytes)、淋巴細胞(Lymphocytes)藍紫色或紫紅色

　　本產品染色效果好、染色力強、著色清晰。本產品用于HeLa細胞的染色效果參考圖1。

　　本產品以無水乙醇為溶劑，與傳統的甲醇溶解法相比，提高了使用的安全性。

　　按推薦稀釋倍數配制染色工作液(1X)，且每樣使用1ml染色工作液(1X)計算，此時本試劑盒的100ml和500ml包裝分別可以檢測2000個和10000個樣品。

　　包裝清單：

　　產品編號產品名稱包裝

　　C0131-100ml改良吉姆薩染色液(20X)100ml

　　C0131-500ml改良吉姆薩染色液(20X)500ml

　　—說明書1份

　　保存條件：

　　室溫避光保存，至少兩年有效。

　　注意事項：

　　血液涂片或骨髓涂片應厚薄均勻，以免影響染色和拍照。

　　本染色液在稀釋后應有類似金屬光澤，否則染色液可能已失效。

　　本染色工作液應保持中性，尤其是用于稀釋的PBS。在酸性環境下，細胞質蛋白正電荷增多，易被伊紅染成紅色;在堿性環境下，細胞質蛋白負電荷增多，易被亞甲基藍染成藍色。酸性或堿性環境都會造成染色異常，以致識別困難，影響正確判斷。推薦使用PBS (C0221A)或PBS (10X) (ST476)。

　　吉姆薩染色液對人體有毒性，且易燃。操作時請特別小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。

　　本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。

　　為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

　　使用說明：

　　1.試劑的準備工作

　　改良吉姆薩染色工作液(1X)的配制：根據樣品數量，取適量改良吉姆薩染色液(20X)，加入PBS或雙蒸水稀釋20倍即成改良吉姆薩工作液(1X)。例如1ml改良吉姆薩染色液(20X)加入19ml PBS，混合均勻，即得20ml改良吉姆薩染色工作液(1X)。注：稀釋后的改良吉姆薩染色工作液(1X)為即用型試劑，不宜保存，應現用現配，以免影響染色效果。

　　2.樣品處理

　　a.對于石蠟切片：

　　二甲苯中脫蠟5-10分鐘。

　　換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。

　　無水乙醇5分鐘。

　　90%乙醇2分鐘。

　　80%乙醇2分鐘。

　　70%乙醇2分鐘。

　　b.對于冰凍切片：

　　蒸餾水洗滌2分鐘。

　　c.對于血液或骨髓涂片：

　　按照常規方法制作血涂片或骨髓涂片，自然晾干。

　　70%乙醇固定10分鐘。

　　d.對于培養細胞：

　　加入70%的乙醇固定10分鐘。

　　3.改良吉姆薩染色

　　a.切片或涂片樣品加入適量配制好的改良吉姆薩染色工作液(1X)染色45分鐘。注：如果染色過深或過淺應調整染色時間或工作液濃度。

　　b.用蒸餾水從一側充分洗滌，干燥后即可在顯微鏡下觀察和拍照。

　　改良吉姆薩染色液上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。古朵試劑盒