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RPAEC細(xì)胞傳代（人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞）

2024年01月25日 11:47通派（上海）生物科技有限公司點(diǎn)擊量：341

細(xì)胞：RPAEC細(xì)胞

中文名稱：人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)基：ECM

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

RPAEC細(xì)胞傳代：

1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。

3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。

 

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

在受精過程中, 哺乳動(dòng)物卵子細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度呈現(xiàn)連續(xù)性反復(fù)升高. 

有證據(jù)表明: 將受精的1-和2-細(xì)胞期的胚胎細(xì)胞核移植到未受精卵中能導(dǎo)致卵子產(chǎn)生鈣升高并使該重構(gòu)胚激活. 

（人 Caco-2細(xì)胞 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞）（人 Ca Ski細(xì)胞 癌細(xì)胞）

然而, 尚不清楚胚胎細(xì)胞核這種誘導(dǎo)卵子內(nèi)鈣升高的能力是如何獲得的, 是否處于不同發(fā)育階段的早期胚胎細(xì)胞核都具有這種能力. （人 D341 Med細(xì)胞髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞）（人 DMF7細(xì)胞 腎細(xì)胞）

利用細(xì)胞核移植技術(shù), 將小鼠受精早期胚胎細(xì)胞核移植到成熟卵母細(xì)胞中, 并測(cè)定該重構(gòu)胚細(xì)胞內(nèi)鈣含量變化

（人 HCT-8細(xì)胞 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞）（人 HEC-1-B細(xì)胞 子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞）

結(jié)果表明:受精1-和2-細(xì)胞期的細(xì)胞核具有誘導(dǎo)成熟卵子鈣釋放活性的功能, 而4-和8-細(xì)胞期細(xì)胞核、融合的2或3個(gè)4-細(xì)胞期的細(xì)胞核及乙醇孤雌活化的原核均不具有這種能力. 

（小鼠 Hepa 1-6細(xì)胞 肝癌細(xì)胞）（人 CCC-HPF-1細(xì)胞 胚肺成纖維細(xì)胞）

結(jié)果說明:胚胎細(xì)胞核誘導(dǎo)卵子細(xì)胞內(nèi)鈣升高的能力是受精過程中產(chǎn)生的,  它存在于早期受精胚的特殊發(fā)育階段. 這暗示早期受精胚這的能力對(duì)胚胎的正常發(fā)育具有重要意義.


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