2024年09月12日 09:32通派(上海)生物科技有限公司點擊量:163
細胞:HCT-15細胞
中文名稱:人T淋巴瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
HCT-15細胞培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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從多利羊開始到現在,體細胞克隆成功率始終很低,一些科學家因此懷疑,這些研究中克隆出的動物是由混入體細胞的成體干細胞發育而成,根本不是真正的體細胞克隆。
為了檢驗成體干細胞和體細胞的克隆潛力,采用了造血干細胞和處于不同分化階段的體細胞進行克隆實驗,包括由造血干細胞初步分化而成的幼稚細胞——祖細胞,以及分化后的成熟體細胞——粒細胞。結果顯示,粒細胞的克隆效率比造血干細胞和祖細胞更高。(U-87 MG細胞 星形膠質母細胞種屬:人)
這一實驗結果表明,即使是已經分化的體細胞,如造血細胞中的粒細胞,也完整地保留了形成個體的所有遺傳信息,可以支持胚胎發育成為個體,而且其成功率甚至遠高于分化程度較低的細胞。(UM細胞黑色素細胞種屬:人)(SW620細胞 結直腸腺癌細胞 種屬:人)
由于實驗證明成體干細胞的克隆成功率比體細胞更低,多利羊作為第一只體細胞克隆動物的身份也因此更加真實可信。
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