
2024年09月14日 09:09通派(上海)生物科技有限公司點擊量:181
細胞:HO-8910PM細胞
中文名稱:人卵巢癌細胞
生長特性:貼壁細胞
HO-8910PM細胞培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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實驗發現,只有那些約3.5天后感染的細胞會產生IL-10。隨后的實驗表明,本質上,暴露于病毒是沒有必要的,而是幾輪復制和增殖(約3天)能夠產生IL-10。
研究表明,無論是在體外條件下獨立的感染下,還是在體內感染過程中,NK細胞的廣泛增殖與IL-10產生有關;
(143B細胞:貼壁細胞通派細胞庫培養條件:90% RPMI-1640、10% FBS)
IL-10的產生是與NK細胞的增殖有關,觸發開關產生IL-10的NK細胞的機制。在感染的小鼠中,對NK細胞增殖前和后的全基因組的構象進行比較。
發現NK細胞尚未發生增殖過程時,IL-10基因被緊緊地包裹起來,而無法進行表達。細胞進行增殖時的IL-10基因被打開使其更容易表達。
(HEK-293細胞:貼壁細胞通派細胞庫培養條件:90% DMEM、10% FBS)
當得到這些結果時,大家都非常興奮,因為在體內的感染過程中,從一個細胞群中挖掘表觀遺傳改變是相當不俗的。
由于在在NK細胞的全基因組中的DNA研究表觀遺傳,而不僅僅是在IL-10基因中,研究人員現在可以返回尋找其他的增殖引起變化的數據中。這可能會告訴他們增殖是否改變NK細胞的其他重要功能。
(293FT細胞:貼壁細胞通派細胞庫培養條件:90% 高糖DMEM、10% FBS)
這是有可能其他的變化在進行,以及它可能被用于其他目的,這也是NK細胞為什么增殖的一個答案。
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