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2024年10月10日 09:51通派(上海)生物科技有限公司點(diǎn)擊量:154
細(xì)胞:TM4細(xì)胞
中文名稱:小鼠睪丸細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:D/F12+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
TM4細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
DNA合成方法取得突破
核糖核酸(RNA)不僅是遺傳信息的載體,還是活細(xì)胞中生命功能的執(zhí)行者,是一類(lèi)重要的檢測(cè)靶標(biāo),在分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)診斷和疾病治療中受到廣泛的關(guān)注。
DT40細(xì)胞:懸浮細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% RIMP1640、10% FBS
一般來(lái)說(shuō),檢測(cè)RNA的方法都需要首先被反轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄形成互補(bǔ)DNA(cDNA),然后在DNA聚合酶的作用下進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)。DRG細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
研究者發(fā)現(xiàn),幾種DNA聚合酶具有內(nèi)在的反轉(zhuǎn)錄酶活性,即以RNA為模板反轉(zhuǎn)錄為cDNA的能力,并且這種cDNA能直接作為模板進(jìn)行后續(xù)的擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。GIST882細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
此項(xiàng)研究的發(fā)現(xiàn),突破了DNA聚合酶只能以DNA為模板合成DNA的傳統(tǒng)觀念,為實(shí)現(xiàn)RNA的單酶和一步法檢測(cè)提供了酶學(xué)基礎(chǔ)。GIST430細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
這種一步法檢測(cè)可以大大縮短反應(yīng)時(shí)間,降低實(shí)驗(yàn)費(fèi)用,對(duì)核酸的即時(shí)檢測(cè),如血液核酸篩查、檢驗(yàn)檢疫(如艾滋病(AIDS)病毒、埃博拉病毒)等領(lǐng)域具有重要意義。
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