2024年10月10日 09:58通派(上海)生物科技有限公司點擊量:109
細胞:WEHI 164細胞
中文名稱:小鼠纖維肉瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
WEHI 164細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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提出DNA在病毒衣殼內組成一種線軸,也許需要其使相關的衣殼旋轉。也有人認為DNA也許需要使相關的組裝發動機旋轉為了維持重要的靜電往來。然而直到現在缺乏試驗工具來證明或反駁這些觀點。
(HepG2.2.15細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:90% DMEM高糖、10% FBS)
通過引入第三個“轉子珠”,使得他們能監控圍繞其軸線的DNA各個角度的變化,同時觀察DNA移位到病毒衣殼中。能夠在其生物任務的不同階段實時跟蹤病毒組裝發動機,并發現這種復雜特殊方式發動機機制被修改以適應外部信號,我們揭示通過仔細設計對照實驗,可能了解主要處理關于微妙的分子機制潛在地不同分子發動機元件的協調。
(GIST-T1細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:89%McCoy’s 5A、1%雙抗、10% FBS )
研究的實驗對象Phi29病毒是枯草芽孢桿菌的一種噬菌體,是在土壤和人腸道中發現的一種細菌。它的DNA組裝發動機復合體包括三個同軸環通過DNA螺旋進入衣殼。
(hCMEC/D3細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:90% RPMI-1640、10% FBS)
發動機復合體的反應核心是一個環形的ATPase,包含5個亞基。Phi29組裝ATPase被認為是一種環形分子馬達模型,通常存在于活細胞中并依賴它們亞基的協調作用來完成重要的生物學功能。
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