
2024年10月12日 09:43通派(上海)生物科技有限公司點擊量:269
細胞:2BS細胞
中文名稱:人胚肺二倍體細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
2BS細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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Giardia線粒體與真核細胞的前世今生
粒線體的確存在Giardia之中,一種線體,和大家所熟悉的粒線體不同的是,Giardia的線體并不能產生能量,它們會被鐵硫化合物聚集起來,(HCEC細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:90% 高糖DMEM、10% FBS )供Giardia產生atp。這個發現也證實了,Giardia根本就不是原核生物過渡到真核生物的中間產物。
和其它細胞一樣,它必須持續產生ATP來當能量貨幣。大部分的真核生物是在粒線體產生ATP,不過Giardia特別的是,它們是在細胞質中利用簡單的無氧呼吸路徑來合成ATP。
(HCCLM3細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:90% DMEM、10% FBS)
Giardia的ATP合成酵素含有鐵硫聚合物,以進行電子傳遞的生化反應。在其它的真核生物中,鐵硫聚合物的合成,都始于粒線體。
(HCC1937細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:90%RPMI-1640、10% FBS)
可是Giardia即然沒有粒線體,哪來的鐵硫聚合物?Giardia原來是利用細胞內的十幾個小胞器來制造鐵硫聚合物的。
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