2024年10月16日 09:00通派(上海)生物科技有限公司點擊量:132
細胞:F9細胞
中文名稱:小鼠畸胎瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
F9細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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Nature干細胞開關——p53基因
干細胞的一個明確定義是它們在保持分化成多種類型細胞的能力的同時,也能長時期地通過細胞的分裂自我更新。
在老鼠的胚胎干細胞中,(通派細胞庫供應:293T細胞)在腫瘤抑制中起關鍵作用的p53基因也能關閉細胞的自我更新功能,并啟動干細胞的分化功能。
考慮到p53識別中毒和DNA損害的功能,(通派細胞庫供應:S-180細胞)研究人員推測:p53也許會通過誘導干細胞的分化和有缺陷的干細胞的死亡來保護干細胞的遺傳穩定性。
p53通過調節基因的表達來間接發揮它的許多作用。發現p53關閉了胚胎干細胞自我更新所必需的基因Nanog。
Nanog的缺失導致了胚胎干細胞的分化。(通派細胞庫供應:GH3細胞)Nanog被認為在調節干細胞的增生中發揮了重要作用,但是目前還不清楚在這一點上p53對它的調節是否對早期發育也很重要。
人類胚胎干細胞的治療潛力讓科學家們對調節細胞自我更新的分子機理產生了興趣,這些發現是在其中發揮重要作用的關鍵一環。
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