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2024年11月06日 08:21通派(上海)生物科技有限公司點擊量:88
細胞:Li-7細胞
中文名稱:人肝癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
Li-7細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
SOX2在人胚胎干細胞和神經(jīng)祖細胞命運決定中的作用機制
人的胚胎干細胞能夠無限自我更新并具有分化全能性,即在體外特定培養(yǎng)條件下能夠分化為來自三胚層的各種細胞類型,因而為疾病的細胞治療提供了新的希望。(通派細胞庫供應(yīng):alpha TC1 clone 6細胞)
目前,人的胚胎干細胞和誘導(dǎo)性多能干細胞已經(jīng)成功地被應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)各類細胞的定向分化,(通派細胞庫供應(yīng):K7M2 wt細胞)例如神經(jīng)干/祖細胞和神經(jīng)元等,為神經(jīng)系統(tǒng)疾病的細胞治療奠定了基礎(chǔ)。
然而要高效安全地實現(xiàn)hESCs和hNPCs的定向分化,充分利用hESCs和hNPCs的潛能,(通派細胞庫供應(yīng):TT細胞)首先必須清楚地認識hESCs和hNPCs自我更新和特性維持的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。
ESCs和NPCs有一個共同的命運決定因子SOX2,(通派細胞庫供應(yīng):Calu-1細胞)它既維持ESCs自我更新又能促進神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和NPCs的維持,因其功能多樣性而備受科研界的矚目。
Sox2對于小鼠胚胎的存活,滋養(yǎng)層和內(nèi)細胞團的分離,(通派細胞庫供應(yīng):MLO-Y4細胞)小鼠ESCs的建系和體外培養(yǎng)維持的作用,同時它還能促進神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育,維持大腦內(nèi)的NSCs/NPCs數(shù)目,保證神經(jīng)元正常分化。
然而長期以來,大部分的研究都將研究范疇局限于Sox2在模式動物ESCs和神經(jīng)系統(tǒng)中的功能,(通派細胞庫供應(yīng):HCC827細胞)而關(guān)于這一重要的核心全能性因子在hESCs和hESCs分化而來的hNPCs中的功能和作用機制研究甚少且存在爭議,且SOX2是如何促進ESCs向神經(jīng)分化的,其促神經(jīng)下游基因有哪些都是亟待回答的重要問題。
通過ChIP-seq,RNA-seq和蛋白質(zhì)譜等手段,(通派細胞庫供應(yīng):LS 174T細胞)全面比較分析了SOX2在hESCs和hNPCs中的轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)。
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