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2024年11月07日 10:25通派（上海）生物科技有限公司點(diǎn)擊量：25
細(xì)胞：MA-104細(xì)胞
中文名稱(chēng)：恒河猴腎細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
MA-104細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）
1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min）
2． 鏡下觀(guān)察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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Smad5雙等位基因剔除ES細(xì)胞的建立及其初步研究
Smad5是TGF-信號(hào)的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子. Smad5的定位剔除導(dǎo)致小鼠胚胎期死亡.
(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：HCT-8細(xì)胞)
為了進(jìn)一步研究Smad5在組織器官發(fā)育中的功能, 利用同源重組技術(shù)獲得了Smad5雙等位基因剔除的胚胎干(ES)細(xì)胞. （通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：SK-N-BE(2)細(xì)胞）
首先利用Cre-LoxP系統(tǒng)刪除了Smad5中靶ES細(xì)胞的抗性基因, 再用相同的打靶載體進(jìn)行轉(zhuǎn)染, 經(jīng)southern雜交篩選獲得了Smad5雙等位基因剔除的ES細(xì)胞. （通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：COLO 205細(xì)胞）
嵌合體研究的結(jié)果表明, Smad5在心臟和神經(jīng)管的正常發(fā)育中可能起重要的作用. （通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：CoLo-TC細(xì)胞）
Smad5雙等位基因剔除ES細(xì)胞在裸鼠皮下可以形成畸胎瘤, 并可分化成包括神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等在內(nèi)的多種細(xì)胞, （通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：Beta-TC-6細(xì)胞）因而Smad5雙等位基因剔除的ES細(xì)胞可用于研究Smad5介導(dǎo)的TGF-信號(hào)在多種組織器官發(fā)育和ES細(xì)胞體外定向分化中的作用.
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