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2024年11月07日 10:32通派(上海)生物科技有限公司點擊量:27
細胞:Malme-3M細胞
中文名稱:人皮膚惡性黑色素瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
Malme-3M細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
SUMO化修飾與細胞的生物鐘
在細胞水平上,它們的生物鐘是被精確地控制著。調(diào)節(jié)性反饋環(huán)通過調(diào)控一些生物鐘蛋白使細胞保持著生理節(jié)律。(通派細胞庫供應:HM-7細胞)
一個調(diào)控生物鐘的核心蛋白-BMAL1,似乎是通過SUMO修飾來實現(xiàn)其功能的。 (通派細胞庫供應:SW620細胞)
BMAL1和CLOCK分子一同結(jié)合稱為E-box的調(diào)節(jié)性DNA序列,來調(diào)控參與生物鐘機制的基因的表達,如PER1(周期同系物-1;period homologue-1)。(通派細胞庫供應:SW527細胞)
BMAL1蛋白當中有好些賴氨酸殘基非常保守,不僅在相同的蛋白家族中保守,而且還具有跨種的保守性。電腦模擬分析發(fā)現(xiàn)這些殘基與用于SUMO化的共有基序非常吻合。(通派細胞庫供應:AGS細胞)
發(fā)現(xiàn)在COS1細胞中,BMAL1被成功地SUMO化,通過定點誘變發(fā)現(xiàn)K259是體內(nèi)SUMO化的主要位點。 (通派細胞庫供應:OS-RC-2細胞)
在肝臟組織中加入SUMO蛋白酶的抑制劑,以穩(wěn)定SUMO化的蛋白質(zhì)。研究者檢測了SUMO化的BMAL1蛋白,發(fā)現(xiàn)該蛋白的量的變化具有周期性。磷酸化的BMAL1與SUMO化的BMAL1同時增加,而且與生物鐘基因(如PER1)的誘導保持一致。 (通派細胞庫供應:ACHN細胞)
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