2024年11月07日 10:32通派（上海）生物科技有限公司點擊量：132
細胞：Malme-3M細胞
中文名稱：人皮膚惡性黑色素瘤細胞
生長特性：貼壁細胞
培養基：MEM+10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
Malme-3M細胞常規培養傳代流程（ 請嚴格遵照無菌操作）
1． 吸出原培養瓶中的培養基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在 1-2min）
2． 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3． 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。
4． 注意培養基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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SUMO化修飾與細胞的生物鐘
在細胞水平上，它們的生物鐘是被精確地控制著。調節性反饋環通過調控一些生物鐘蛋白使細胞保持著生理節律。(通派細胞庫供應：HM-7細胞)
一個調控生物鐘的核心蛋白-BMAL1，似乎是通過SUMO修飾來實現其功能的。 （通派細胞庫供應：SW620細胞）
BMAL1和CLOCK分子一同結合稱為E-box的調節性DNA序列，來調控參與生物鐘機制的基因的表達，如PER1（周期同系物-1；period homologue-1）。（通派細胞庫供應：SW527細胞）
BMAL1蛋白當中有好些賴氨酸殘基非常保守，不僅在相同的蛋白家族中保守，而且還具有跨種的保守性。電腦模擬分析發現這些殘基與用于SUMO化的共有基序非常吻合。（通派細胞庫供應：AGS細胞）
發現在COS1細胞中，BMAL1被成功地SUMO化，通過定點誘變發現K259是體內SUMO化的主要位點。 （通派細胞庫供應：OS-RC-2細胞）
在肝臟組織中加入SUMO蛋白酶的抑制劑，以穩定SUMO化的蛋白質。研究者檢測了SUMO化的BMAL1蛋白，發現該蛋白的量的變化具有周期性。磷酸化的BMAL1與SUMO化的BMAL1同時增加，而且與生物鐘基因（如PER1）的誘導保持一致。 （通派細胞庫供應：ACHN細胞）
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